细菌生物被膜检测方法的研究进展
作者：
陈春艳;李水红;朱翠明
期刊：
微生物学免疫学进展 ,2017年45(3):51-56 ISSN：1005-5673
作者机构：
南华大学医学院病原生物学研究所,湖南衡阳,421001;[陈春艳] 南华大学
关键词：
细菌生物被膜;生物被膜形成;表型;基因型;检测方法
摘要：
细菌生物被膜（bacterial biofilm,BF）是细菌黏附于接触物表面,由细菌自身分泌的胞外基质包裹形成的多细胞微生物群体,是微生物界细菌普遍的生存状态。基于生物被膜的物理屏障作用和膜内特殊微环境,其具有多重耐药性以及较强的黏附性、抗吞噬性等特性,导致所致疾病迁延不愈,已成为医疗卫生领域的重大挑战。早期、快速、准确检测生物被膜形成对及时有效防治其感染性疾病至关重要。现从表型和基因型检测两个方面对细菌生物被膜检测方法作一综述。
语种：
中文
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虚拟仿真实验在医学微生物学实验教学中的应用体会
作者：
李忠玉;唐双阳;周洲;赵飞骏;朱翠明;...
期刊：
山西医科大学学报 ,2016年(2):135-136 ISSN：1007-6611
作者机构：
南华大学医学院医学微生物学教研室,衡阳,421001;[唐双阳; 李忠玉; 赵飞骏; 朱翠明; 曾焱华; 周洲] 南华大学
关键词：
医学微生物学;实验教学;虚拟仿真实验
摘要：
虚拟仿真实验教学是高等教育信息化建设的重要内容。虚拟仿真实验在医学微生物学实验教学中发挥重要作用，不仅可拓展由于实验室生物安全、经费和场地设施紧张等问题而不能开设的实验项目，开阔知识领域，而且可以强化学生实验基本技能和激发学生求知欲，对于培养学生的科学精神和创造性思维，提高专业技能均具有重要意义。
语种：
中文
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生殖支原体脂质相关膜蛋白通过c-Src/ROS/Nrf2途径诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶
作者：
何璐;游晓星;李国华;曾焱华;李冉辉;...
期刊：
中南医学科学杂志 ,2015年(4):364-368 ISSN：2095-1116
作者机构：
南华大学附属第一医院妇产科，湖南 衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所，特殊病原体防控湖南省重点实验室;南华大学心血管疾病研究所;南华大学附属第一医院妇产科,湖南 衡阳,421001;[李冉辉; 李国华; 吴移谋; 余敏君; 朱翠明; 游晓星; 曾焱华] 南华大学
关键词：
生殖支原体;脂质相关膜蛋白;血红素氧合酶-1;滋养层细胞
摘要：
目的：探讨生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶-1(HO-1)的分子机制。方法用0.5~5μg/mL生殖支原体LAMPs处理体外培养的胎盘滋养层细胞4~12 h,采用实时定量PCR和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达以及核因子相关因子-2(Nrf2)的核转位；比色法观察HO-1的酶活性；2ˊ,7ˊ-二氯二氢荧光黄二乙酸酯( H2 DCFDA)检测活性氧产生。分别采用酪氨酸激酶c-Src抑制剂PP1、活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸( NAC)和Nrf2 siRNA干预,观察HO-1的表达情况。结果生殖支原体LAMPs能诱导滋养层细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达,上调其酶活性。同时,LAMPs也能诱导其产生活性氧,并促使Nrf2核转位。 PP1和NAC预处理后,可明显降低HO-1的表达水平以及细胞核内Nrf2含量。采用Nrf2 siRNA转染后,HO-1的表达显著减少。结论生殖支原体LAMPs通过c-Src/ROS/Nrf2途径诱导滋养层细胞表达HO-1。
语种：
中文
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肺炎支原体脂质相关膜蛋白刺激THP-1细胞表达血红素氧合酶-1
作者：
谭田平;欧广利;刘艳;何军;游晓星;...
期刊：
中华微生物学和免疫学杂志 ,2015年35(2):112-116 ISSN：0254-5101
通讯作者：
Zhu, C.
作者机构：
[谭田平; 欧广利; 游晓星; 曾焱华; 余敏君; 朱翠明] 南华大学病原生物学研究所;[何军] 南华大学附属南华医院检验科;[刘艳] 邵阳医学高等专科学校
通讯机构：
[Zhu, C.] I;Institute of Pathogen Biology, University of South China, Hengyang, China
关键词：
肺炎支原体;脂质相关膜蛋白;血红素氧合酶-1
摘要：
目的：研究肺炎支原体（ Mycoplasma pneumonia， Mp）脂质相关膜蛋白（ lipid-associated membrane proteins ， LAMPs）对人单核细胞系THP-1表达血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1，HO-1）的影响。方法体外培养THP-1细胞，根据实验目的加入不同浓度LAMPs作用不同时间，并设阳性和阴性对照。收集各处理组细胞，LDH漏出实验检测LAMPs对THP-1细胞的毒性，实时荧光反转录PCR检测 HO-1 mRNA 表达， Western blot 检测 HO-1蛋白表达，比色法检测 HO-1酶活性。结果LAMPs浓度为10μg／ml时，LDH漏出率明显增高。 LAMPs刺激THP-1细胞9 h后HO-1 mRNA表达水平最高；HO-1蛋白表达水平与LAMPs刺激呈剂量依赖性和时间依赖性，其中5．0μg／ml LAMPs刺激表达的HO-1蛋白水平最高；LAMPs刺激12 h 后的HO-1蛋白浓度最高。 LAMPs刺激THP-1细胞后，随着HO-1表达水平的增高，其酶活性亦显著增强。结论 Mp LAMPs可诱导THP-1细胞表达HO-1，并可上调其酶活性。
语种：
中文
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生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1从而负调控细胞因子分泌
作者：
何璐;游晓星;李国华;曾焱华;李冉辉;...
期刊：
细胞与分子免疫学杂志 ,2015年31(2):194-198 ISSN：1007-8738
作者机构：
[何璐] Departments of Gynecology and Obstetrics, First Affiliated Hospital, Institute of Pathogenic Biology, Medical College, Hunan Provincial Key Laboratory for Special Pathogens Prevention and Control, Hengyang 421001, China;[吴移谋; 朱翠明; 游晓星; 余敏君; Zeng, Yanhua; 李冉辉] Institute of Pathogenic Biology, Medical College, Hunan Provincial Key Laboratory for Special Pathogens Prevention and Control, Hengyang 421001, China;[李国华] Institute of Cardiovascular Disease, University of South China, Hengyang 421001, China
关键词：
生殖支原体;脂质相关膜蛋白;血红素氧合酶-1;滋养层细胞
摘要：
目的观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1(HO-1), 从而影响细胞因子的产生。方法体外培养胎盘滋养层细胞, 用0.5~5 μg/mL LAMP作用4~12 h。实时定量PCR和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达以及核因子相关因子2(Nrf2)的核转位; 2′, 7′-二氯二氢荧光黄二乙酸酯(H_2 DCFDA)检测活性氧(ROS)产生; 采用N-乙酰半胱氨酸(NAC)或Nrf2 siRNA处理滋养层细胞, 观察其对HO-1表达的影响。采用HO-1的激动剂钴原卟啉(CoPP), 抑制剂锌原卟啉(ZnPP)或HO-1 siRNA处理细胞, ELISA检测处理前后LAMP对诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)分泌的影响。结果LAMP能诱导滋养层细胞HO-1 mRNA和蛋白表达, 并能诱导其产生ROS以及促进Nrf2核转位。ROS抑制剂NAC预处理后, 可明显降低HO-1的表达水平以及细胞核内Nrf2含量。同时, Nrf2 siRNA转染后, HO-1表达显著减少。采用ZnPP处理滋养层细胞, 或RNA干扰HO-1表达后, 可促进LAMP诱导滋养层细胞分泌TNF-α和IL-1β, 而CoPP处理能进一步降低TNF-α和IL-1β水平。结论LAMP能通过ROS/Nrf2诱导滋养层细胞表达HO-1, 从而抑制细胞因子的过度分泌。
语种：
中文
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The immunological competence of multiple antigen peptides based on the mimic epitope of Mycoplasma genitalium adhesion protein
作者：
Yanhua Zeng;Xiaoxing You;Cuiming Zhu;Jun He;Yimou Wu
作者机构：
[Yanhua Zeng; Xiaoxing You; Cuiming Zhu; Yimou Wu] Institute of Pathogenic Biology, University of South China, Hengyang 421001, China;[Jun He] Department of Clinical Laboratory, the Affiliated Nanhua Hospital of University of South China, Hengyang 421001, China
会议名称：
The 6th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM)The 7th Meeting of the Chinese Society for Mycoplasmology (CSM)(第七届全国支原体学术会议暨第六届亚洲支原体学术会议)
会议时间：
2014-8-22
会议地点：
张家界
会议主办单位：
中华医学会微生物与免疫学分会;亚洲支原体学组织
会议论文集名称：
The 6th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM)The 7th Meeting of the Chinese Society for Mycoplasmology (CSM)(第七届全国支原体学术会议暨第六届亚洲支原体学术会议)论文集
关键词：
Mycoplasma genitalium;Adhesin protein;Mimic epitope;Multiple antigen peptides;Immunogenicity
摘要：
Objective To analyze the the humoral and cellular immune response levels of multiple antigen peptides (MAPs) containing the mimic epitope of the adhesion protein of Mycoplasma genitalium Pa (MgPa) in order to provide the theoretical basis for the development of multi-epitope-baseded marker vaccines.
语种：
英文
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Nrf2／ARE 通路在抗病原生物感染中的作用研究进展
作者：
欧广利(综述);朱翠明(审校)
期刊：
微生物学免疫学进展 ,2014年(1):56-60 ISSN：1005-5673
作者机构：
南华大学医学院病原生物学研究所,湖南衡阳,421001;[朱翠明(审校); 欧广利(综述)] 南华大学
关键词：
Nrf2/ARE通路;抗感染;病原生物
摘要：
氧化应激反应是病原生物感染并致病的重要环节，病原生物感染可诱导宿主细胞产生大量的活性氧（ ROS）或直接激活Nrf2/ARE通路，产生一系列保护性蛋白，保护宿主细胞抵抗氧化应激损伤。转录因子NF-E2相关因子2（ Nrf2）是宿主细胞调节抗氧化应激的一种关键转录因子，可与抗氧化反应元件（ ARE）相互作用，诱导抗氧化酶/Ⅱ相解毒酶基因的表达，从而在细胞保护防御中发挥重要作用。 Nrf2的表达活性与病原生物感染密切相关，对Nrf2/ARE通路在抗病原生物感染中的最新研究进展进行了综述。
语种：
中文
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湖南地区3545例结核病患者梅毒螺旋体感染情况分析
作者：
刘丹;刘艳;岳军;朱翠明;粟兴;...
期刊：
山东医药 ,2014年(14):48-49 ISSN：1002-266X
作者机构：
南华大学病原生物学研究所，湖南衡阳421001;邵阳市疾病预防控制中心;邵阳医学高等专科学校;南华大学病原生物学研究所,湖南衡阳,421001;[刘艳; 朱翠明; 刘丹] 南华大学
关键词：
梅毒螺旋体;梅毒;结核病
摘要：
目的：分析湖南地区结核病（ TB）患者中梅毒螺旋体（ TP）感染状况及特征。方法采集3545例TB患者静脉血进行TP相关血清学检测，同时收集患者临床资料并行流行病学调查。结果3545例TB患者中共检出TP感染106例（2．99％）。不同年份TB患者TP感染率差异有统计学意义（P＜0．01），且总体呈上升趋势。男性TP感染率（3．75％）高于女性（2．04％），P＜0．01。21～50岁组感染率（4．53％）、51～88岁组感染率（3．20％）高于6～20岁组（1．03％），P均＜0．01。职业不详（含不便分类者）感染率（5．25％）＞工人组（2．68％）＞农民组（2．56％），P均＜0．01。检出3种合并感染模式，共计17例（占16．04％）。其中TP合并HBV、TP合并HCV双重感染分别为12例（0．34％）、4例（0．11％）；TP、HBV、HIV三重感染1例（0．28‰）。结论湖南地区TB患者有着较高的TP感染率，且伴有HCV和HIV合并感染的趋势。应进一步加大TB患者中TP、HBV、HIV、HCV监测力度，制定有针对性的防治对策。
语种：
中文
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Macrophage-Activating Lipopeptide-2 Requires Mal and PI3K for Efficient Induction of Heme Oxygenase-1
作者：
You, Xiaoxing;Liu, Liangzhuan;Zeng, Yanhua;Li, Ranhui;He, Jun;...
期刊：
PLOS ONE ,2014年9(7):e103433 ISSN：1932-6203
通讯作者：
Wu, Yimou
作者机构：
[Jiang, Chuanhao; Wu, Yimou; Liu, Liangzhuan; He, Jun; Ou, Guangli; Zhu, Cuiming; Chen, Liesong; You, Xiaoxing; Yu, Minjun; Zeng, Yanhua; Li, Ranhui; Ma, Xiaohua] Univ South China, Coll Med, Inst Pathogen Biol, Hengyang City, Peoples R China.;[Ma, Xiaohua] Changsha Cent Hosp, Dept Clin Lab, Chagnsha City, Peoples R China.;[He, Jun] Univ South China, Affiliated Nanhua Hosp, Dept Clin Lab, Hengyang City, Peoples R China.
通讯机构：
[Wu, Yimou] U;Univ South China, Coll Med, Inst Pathogen Biol, Hengyang City, Peoples R China.
关键词：
Transfection;Small interfering RNA;Immune receptor signaling;Inflammation;Phosphorylation;Mycoplasma;Inflammatory diseases;Luciferase
摘要：
AIMS: This study is to investigate the mechanisms by which macrophage-activating lipopeptide-2 (MALP-2) induces heme oxygenase (HO)-1, a cytoprotective enzyme that catalyzes the degradation of heme, in human monocytes. METHODS: Human monocytic THP-1 cells were cultured for transient transfection with plasmids and stimulation with MALP-2 for indicative time intervals. After incubation with MALP-2, cells were collected and disrupted, before being tested for promoter activity using luciferase assay. For analysis of proteins, immunoreactive bands were detected using an enhanced chemiluminescence Western blotting system, and the band intensity was measured by densitometryic analysis. For the detection of co-immunoprecipitation, SDS-PAGE was performed and the membranes were probed using respective antibodies. To investigate the cellular localization of NF-E2-related factor 2 (Nrf2), cells underwent immunofluorescence staining and confocal microscopy, and were analyzed using electrophoretic mobility shift assay. RESULTS: MALP-2-induced HO-1 expression and promoter activity were abrogated by transfection with dominant negative (DN) plasmids of TLR2 and TLR6, or their neutralizing antibodies. However, inhibition of MyD88 or transfection with the DN-MyD88 was insufficient to attenuate HO-1 expression. In contrast, mutation or silencing of MyD88 adapter-like (Mal) by DN-Mal or siRNA almost completely blocked HO-1 induction. Btk, c-Src and PI3K were also involved in MALP-2-induced HO-1 expression, as revealed by specific inhibitors LFM-A13, PP1 and LY294002, or by transfection with siRNA of c-Src. MALP-2-induced activation of PI3K was attenuated by transfection with DN mutant of Mal, and by pretreatment with LFM-A13 or PP1. Furthermore, MALP-2 stimulated the translocation of Nrf2 from the cytosol to the nucleus and Nrf2 binding to the ARE site in the HO-1 promoter, which could also be inhibited by pretreatment with a PI3K inhibitor, LY294002. CONCLUSIONS: These results indicated that MALP-2 required TLR2/6, Btk, Mal and c-Src to activate PI3K, which in turn initiated the activation of Nrf2 for efficient HO-1 induction.
语种：
英文
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生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2
作者：
谢婧;游晓星;曾焱华;李冉辉;陈列松;...
期刊：
细胞与分子免疫学杂志 ,2014年30(12):1266-1270 ISSN：1007-8738
作者机构：
[谢婧] Departments of Obstetrics, Center Hospital of Hengyang, Hengyang 421001, China;[吴移谋; 陈列松; 朱翠明; 游晓星; 余敏君; Zeng, Yanhua; 李冉辉] Institution of Pathogenic Biology, Medical College, Hengyang 421001, China;[何军] Institution of Pathogenic Biology, Medical College, Department of Clinical Laboratory, Affiliated Nanhua Hospital, University of South China, Hengyang 421001, China
关键词：
生殖支原体;脂质相关膜蛋白;β-防御素2;宫颈上皮细胞
摘要：
目的观察生殖支原体脂质相关膜蛋白（LAMP）能否诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2（hBD-2）,并探讨其可能的调控机制。方法体外培养End1/E6E7人宫颈上皮细胞,用不同浓度的LAMP作用细胞48 h,反转录PCR检测hBD-2 mRNA的表达,Western blot法检测hBD-2蛋白的表达;用Toll样受体2（TLR2）和TLR6中和抗体孵育End1/E6E7细胞,并用TLR2、TLR6和MyD88负显性突变体转染细胞,以明确TLR2、TLR6和MyD88在介导hBD-2表达中的作用;Western blot法检测核因子κB（NF-κB）p65亚基核转位情况,电泳迁移率实验（EMSA）分析LAMP处理前后NF-κB的DNA结合活性;采用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）处理,观察对hBD-2表达的影响。结果生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2mRNA和蛋白。TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后,能降低hBD-2表达;MyD88负显性突变体也能显著抑制LAMP诱导的hBD-2表达。Western blot结果显示,LAMP处理后可诱导p65核转位,并能增强NF-κB的DNA结合活性。而NF-κB抑制剂PDTC处理后,hBD-2表达降低。结论生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2,可能受TLR2、TLR6/MyD88/NF-κB调控。
语种：
中文
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支原体巨噬细胞活化脂肽2诱导单核细胞系THP-1表达血红素氧合酶1及其机制研究
作者：
游晓星;马小华;刘良专;曾焱华;余敏君;...
期刊：
中华微生物学和免疫学杂志 ,2014年34(6):453-458 ISSN：0254-5101
通讯作者：
Wu, Y.
作者机构：
南华大学病原生物学研究所, 衡阳,421001;421001 衡阳，南华大学病原生物学研究所;长沙市中心医院;[何军] 南华大学附属南华医院;[马小华; 蒋传好; 吴移谋; 刘良专; 朱翠明; 余敏君; 游晓星; 曾焱华] 南华大学
通讯机构：
[Wu, Y.] I;Institute of Pathogenic Biology, Medical College, University of South China, Hengyang 421001, China
关键词：
支原体巨噬细胞活化脂肽2;血红素氧合酶-1;单核细胞
摘要：
目的：观察支原体巨噬细胞活化脂肽2（macrophage-activating lipopeptide-2， MALP-2）能否诱导人单核细胞系THP-1表达血红素氧合酶-1（hemeoxygenase，HO-1），并探讨其相应的调控机制，以明确机体抵抗支原体感染所致炎性损伤的自我防御机制。方法体外培养THP-1细胞，用不同浓度的MALP-2作用12 h， Western blot检测HO-1的表达；THP-1细胞经TLR2和TLR6中和抗体孵育，或构建TLR2和TLR6负显性突变体转染细胞，以明确TLR2和TLR6在介导HO-1表达中的作用；Western blot检测Akt磷酸化情况，并采用PI3K抑制剂LY294002处理细胞，以证实PI3K参与HO-1表达。同时，分别采用EMSA和免疫荧光观察核转录因子Nrf2的DNA结合活性和核转位，并采用Nrf2 siRNA干扰其表达后，Western blot检测HO-1表达。最后，采用siRNA干扰HO-1表达，或采用HO-1的激动剂钴原卟啉（ cobalt protoporphyrin ，CoPP）处理THP-1细胞，ELISA检测细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌。结果 MALP-2能诱导THP-1细胞表达HO-1。且TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后，HO-1表达水平显著降低；此外，MALP-2能激活PI3K，PI3K抑制剂能抑制HO-1表达；MALP-2能增强Nrf2的DNA结合活性及核转位，PI3K抑制剂处理后，Nrf2的DNA结合活性以及核转位水平进一步降低。 RNA干扰Nrf2后，HO-1表达显著降低。沉默HO-1表达后，TNF-α和IL-1β分泌增高，而CoPP处理能进一步降低TNF-α和IL-1β水平。结论 MALP-2能诱导THP-1细胞表达HO-1，其机制可能受TLR2、6/PI3K/Nrf2通路调控。 HO-1的表达可在一定程度上负调控细胞因子过度分泌。
语种：
中文
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逆向案例教学法在医学微生物学教学中的应用
作者：
曾焱华;朱翠明;赵飞骏;吴移谋
期刊：
中国高等医学教育 ,2014年(11):104-105 ISSN：1002-1701
作者机构：
南华大学医学院,湖南衡阳,421001;[吴移谋; 赵飞骏; 朱翠明; 曾焱华] 南华大学
关键词：
医学微生物学;病案教学法;逆向案例教学法
摘要：
针对医学微生物学与临床医学的紧密联系性,以白喉棒状杆菌为例,介绍逆向案例教学法在医学微生物学教学中的内涵和实施步骤,总结逆向案例教学法与传统教学法相比所具有的优势和实施过程中应注意的问题,以便探讨其在医学微生物学教学中应用的可行性。
语种：
中文
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The lipid-associated membrane proteins derived from Mycoplasma pneumoniae induced the expression of HO-1 in THP-1 cells
作者：
Tianping Tan;Guangli Ou;Yan Liu;Xiaoxing You;Yanhua Zeng;...
作者机构：
[Tianping Tan; Guangli Ou; Xiaoxing You; Yanhua Zeng; Minjun Yu; Cuiming Zhu] Institute of Pathogen Biology, University of South China, Hengyang City, Hunan Province, P.R.China;[Tianping Tan] The 415 affiliated hospital, University of South China, Hengyang City, Hunan Province, P.R.China;[Yan Liu] Shaoyang Medical College, Shaoyang City, Hunan Province, P.R.China
会议名称：
The 6th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM)The 7th Meeting of the Chinese Society for Mycoplasmology (CSM)(第七届全国支原体学术会议暨第六届亚洲支原体学术会议)
会议时间：
2014-8-22
会议地点：
张家界
会议主办单位：
中华医学会微生物与免疫学分会;亚洲支原体学组织
会议论文集名称：
The 6th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology (AOM)The 7th Meeting of the Chinese Society for Mycoplasmology (CSM)(第七届全国支原体学术会议暨第六届亚洲支原体学术会议)论文集
关键词：
Mycoplasma pneumoniae;lipid-associated membrane proteins (LAMPs);heme oxygenase 1 (HO-1)
摘要：
Objectives This study was to investigate the expression of heme oxygenase 1 (Heme oxygenase, HO-1) induced by the lipid-associated membrane proteins(LAMPs) derived from Mycoplasma pneumoniae in the human monocyte cell line THP-1 cells.Methods The cytotoxicity of LAMPs to THP-1 cells was investigated by CCK-8 test.THP-1 cells were stimulated by different concentration of LAMPs for different time, and the expression of HO-1 protein and mRNA were detected by Western blot and qRTPCR respectively.
语种：
英文
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支原体巨噬细胞活化脂肽2经MAPKs和Nrf2途径诱导人单核细胞血红素氧合酶-1产生
作者：
马小华;游晓星;曾焱华;刘良专;朱翠明;...
期刊：
中华微生物学和免疫学杂志 ,2014年34(4):289-293 ISSN：0254-5101
通讯作者：
Wu, Y.
作者机构：
410004 长沙市中心医院检验科;421001 衡阳，南华大学病原生物学研究所;南华大学病原生物学研究所, 衡阳,421001;[何军] 南华大学附属南华医院;[马小华; 蒋传好; 吴移谋; 刘良专; 朱翠明; 游晓星; 曾焱华] 南华大学
通讯机构：
[Wu, Y.] I;Institute of Pathogenic Biology, Medical College of University of South China, Hengyang 421001, China
关键词：
巨噬细胞活化脂肽2;血红素氧合酶-1;转录因子NF-E2相关因子2
摘要：
目的：探讨支原体巨噬细胞活化脂肽2（ MALP-2）能否诱导人单核细胞系THP-1产生血红素氧合酶-1（HO-1），并探讨其可能的调控机制。方法体外培养THP-1细胞，根据实验目的，用不同浓度的MALP-2作用12 h，或一定浓度的MALP-2作用不同时间后，real-time PCR和Western blot分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达；比色法分析 HO-1酶活性情况；采用丝裂原活化蛋白激酶（ MAPKs）特异性抑制剂（30μmol/L SB203580、PD98059和SP600125）预处理THP-1细胞30 min后加入5．0 ng/ml MALP-2共孵育细胞，Western blot检测HO-1的蛋白表达。提取MALP-2处理后的核蛋白及胞质蛋白，Western blot检测转录因子NF-E2相关因子2（NF-E2-related factor 2，Nrf2）在细胞核及胞质中的表达情况，并采用Nrf2 siRNA干扰Nrf2表达后，检测Nrf2和HO-1表达情况。结果 MALP-2能以浓度依赖性方式诱导人单核细胞系THP-1表达HO-1 mRNA和蛋白质，同时，HO-1的酶活性也随着MALP-2浓度的递增而增强；30μmol/L MAPK特异性抑制剂SB203580、PD98059和SP600125处理THP-1细胞后，MALP-2诱导HO-1的表达量随之降低；5．0 ng/ml MALP-2能降低细胞质内Nrf2的表达水平，同时增加其细胞核内含量；且转染Nrf2 siRNA 后，HO-1的表达显著降低。结论 MALP-2诱导的HO-1表达受MAPK和Nrf2的调控。
语种：
中文
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Detection of Mycoplasma pneumoniae P1 subtype variations by denaturing gradient gel electrophoresis
作者：
Xiao, Jinhong;Liu, Yang;Wang, Minggui;Jiang, Chuanhao;You, Xiaoxing;...
期刊：
Diagnostic Microbiology and Infectious Disease ,2014年78(1):24-28 ISSN：0732-8893
通讯作者：
Zhu, Cuiming
作者机构：
[Jiang, Chuanhao; Xiao, Jinhong; Zhu, Cuiming; You, Xiaoxing] Univ South China, Dept Microbiol & Immunol, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Xiao, Jinhong] Hunan Prov Peoples Hosp, Clin Lab, Changsha 410005, Hunan, Peoples R China.;[Wang, Minggui; Liu, Yang] Fudan Univ, Huashan Hosp, Inst Antibiot, Shanghai 200040, Peoples R China.
通讯机构：
[Zhu, Cuiming] U;Univ South China, Dept Microbiol & Immunol, Hengyang 421001, Peoples R China.
关键词：
P1 gene;Subtpying;Variation
摘要：
There were several methods to detect p1 gene variations in Mycoplasma pneumoniae. In this study polymerase chain reaction (PCR)-based denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) assay was performed to establish a rapid and precise detection method for identifying M. pneumoniae p1 gene variations. We detected p1 gene variations in 109. M. pneumoniae clinical isolates from Shanghai, China, which were collected from 2009 to 2011 by DGGE, and compared this method with the PCR-based restriction fragment length polymorphism assay and sequencing. By PCR-DGGE method, among the 109. M. pneumoniae isolates, 101 (92.7%) isolates were classified into type I, and 8 (7.3%) were classified into type II. Seven (6.9%) type I variations and 8 (100%) type II variations were identified. The match rate of p1 gene variation detected by DGGE reached 100% when compared to DNA sequencing and was more sensitive than restriction fragment length polymorphism. One new type II variant, designated as V2d, was found in this study. The sequence of the new variant was characterized. Our results indicated that PCR-DGGE is a rapid and reliable bio-technique for direct detection of p1 gene variations. © 2014 Elsevier Inc.
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英文
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Mycoplasma fermentans MALP-2 induces heme oxygenase-1 expression via mitogen-activated protein kinases and Nrf2 pathways to modulate cyclooxygenase 2 expression in human monocytes
作者：
Ma, Xiaohua;You, Xiaoxing;Zeng, Yanhua;He, Jun;Liu, Liangzhuan;...
期刊：
Clinical and Vaccine Immunology ,2013年20(6):827-834 ISSN：1556-6811
通讯作者：
Wu, Yimou
作者机构：
[Jiang, Chuanhao; Wu, Yimou; Liu, Liangzhuan; Deng, Zhongliang; He, Jun; Zhu, Cuiming; You, Xiaoxing; Yu, Minjun; Zeng, Yanhua; Wu, Haiying; Ma, Xiaohua] Univ South China, Coll Med, Inst Pathogen Biol, Hengyang, Peoples R China.;[He, Jun] Univ South China, Affiliated Nanhua Hosp, Dept Clin Lab, Hengyang, Peoples R China.
通讯机构：
[Wu, Yimou] U;Univ South China, Coll Med, Inst Pathogen Biol, Hengyang, Peoples R China.
摘要：
Heme oxygenase-1 (HO-1) is a stress-inducible rate-limiting enzyme in heme degradation that confers cytoprotection against oxidative injury and performs a vital function in the maintenance of cell hemostasis. Increasing numbers of reports have indicated that mycoplasma-derived membrane lipoproteins/ lipopeptides, such as macrophage-activating lipopeptide-2 (MALP-2), function as agents that stimulate the immune system by producing various inflammatory mediators, such as cytokines and cyclooxygenase 2 (COX-2), which play roles in the pathogenesis of inflammatory responses during mycoplasma infection. Here, we report that MALP-2 induced HO-1 mRNA and protein expression and upregulated HO-1 enzyme activity in THP-1 cells. Specific inhibitors of mitogen-activated protein kinases (MAPKs), SB203580, PD98059, and SP600125, significantly abolished HO-1 expression. In addition, MALP-2 also induced NF-E2-related factor 2 (Nrf2) translocation, and the silencing of Nrf2 expression in THP-1 cells decreased the levels of MALP-2-mediated HO-1 expression. Furthermore, COX-2 protein expression levels were upregulated in THP-1 cells in response to MALP-2, and transfection with small interfering RNAs of HO-1 significantly increased COX-2 accumulation. These results demonstrate that MALP-2 induces HO-1 expression via MAPKs and Nrf2 pathways and, furthermore, that MALP-2-induced COX-2 expression was modulated by HO-1 in THP-1 cells. Copyright © 2013, American Society for Microbiology. All Rights Reserved.
语种：
英文
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抗结核治疗后脂肪肝形成的临床观察
作者：
刘艳;刘丹;朱翠明;黄泽智;朱瑾;...
期刊：
中国临床药理学与治疗学 ,2013年18(11):1280-1283 ISSN：1009-2501
作者机构：
南华大学医学微生物学与免疫教研室,衡阳421001,湖南;邵阳医学高等专科学校检验系,邵阳422000,湖南;湖南省邵阳市疾病预防控制中心,邵阳422000,湖南;[刘艳; 刘丹; 朱翠明] 南华大学;[黄泽智; 朱瑾; 蒙松年] 邵阳医学高等专科学校
关键词：
结核;治疗;脂肪肝;药物性肝损害
摘要：
目的探讨抗结核药物所致脂肪肝（fatty liver）和药物性肝损害（Drug-induced liver injury，DILI）的发生机理。方法选取200例经结核病防治机构明确诊断为结核病患者病例为研究对象，分别于抗结核治疗前、后进行肝功能、血脂监测，治疗前、后均行肝区CT扫描。有关实验数据经统计学处理。结果抗结核治疗后脂肪肝发生率为28.00%（56/200），DILI的发生率为32.00%（64/200）。血清ALT、AST水平均高于治疗前（P < 0.05，P < 0.05）。其中ALT在治疗后的第1、2、3个月、AST在治疗后的第1、2、3、4个月升高最为明显，差异有统计学意义（P<0.01，P<0.01）。TG、HDL-C、LDL-C、apoB水平均显著高于治疗前（P < 0.05，P < 0.05，P < 0.05，P < 0.05）。其中TG在治疗后的第2、3、4个月、LDL-C在第3、4个月、apoB在第1、2、3、4、5个月升高最为明显（P < 0.01，P < 0.01，P < 0.01）。血清ALT、AST升高均与TG、apo B、HDL-C、LDL-C呈显著正相关（P < 0.01，P < 0.01，P < 0.05，P < 0.05）。结论抗结核治疗中脂肪肝的形成提示DILI已发生。加强肝功能、血脂指标的监测可减少、减轻DILI的发生，防止脂肪肝形成，保证抗结核治疗方案的顺利实施。
语种：
中文
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基于生殖支原体黏附蛋白模拟表位的多抗原肽免疫效果的观察
作者：
曾焱华;何军;游晓星;唐双阳;朱翠明;...
期刊：
中华微生物学和免疫学杂志 ,2013年33(4):287-292 ISSN：0254-5101
通讯作者：
Wu, Y.-M.
作者机构：
[唐双阳; 游晓星; 余敏君; 朱翠明; 吴移谋; Zeng Y.-H.] Institute of Pathogenic Biology, University of South China, Hengyang 421001, China
通讯机构：
[Wu, Y.-M.] I;Institute of Pathogenic Biology, University of South China, China
关键词：
生殖支原体;黏附蛋白;模拟表位;多抗原肽;免疫原性
摘要：
目的 制备基于生殖支原体黏附蛋白(MgPa)模拟表位的多抗原肽(MAP),检测其诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫应答的水平,为研制安全、有效的基于模拟表位的Mg表位肽疫苗奠定实验基础.方法 以多聚赖氨酸为核心基质,人工合成3种含MgPa模拟表位的八分枝MAP,用反相高效液相色谱(RP-HPLC)和质谱分析对其进行纯化与鉴定.将其单独或混合免疫BALB/c小鼠.间接ELISA测定小鼠血清中的特异性IgG抗体及其亚类的水平；MTT比色法检测MAP刺激免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖反应,并用ELISA检测其脾细胞培养上清中的IL-4和IFN-γ水平.结果 成功合成了较高纯度的含MgPa模拟表位的3种MAP,这3种MAP均能刺激小鼠产生IgG抗体,且以Th1型免疫应答产生的IgG2a型抗体为主；与单个MAP组相比,混合MAP免疫组小鼠产生了更多的IgG、IgG1和IgG2a抗体(P均＜0.01)；3种MAP均能特异性诱导免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖,且能刺激其产生较多的IL-4和IFN-γ,混合MAP免疫组小鼠产生的IL-4和IFN-γ,与单个MAP组相比差异具有统计学意义(P均＜0.01).结论 基于MgPa模拟表位的3种MAP均能刺激小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答,且混合免疫组诱导的免疫应答效果比单个MAP组更好.
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肺炎支原体脂质膜蛋白诱导人支气管上皮细胞SPLUNC1的表达
作者：
肖丁良;钟礼立;梁沫;黄寒;朱翠明;...
期刊：
医学临床研究 ,2013年30(6):1041-1045 ISSN：1671-7171
作者机构：
[肖丁良; 钟礼立; 梁沫; 黄寒; 彭力; 谢乐云] 湖南省人民医院儿科,湖南 长沙 410005
会议名称：
庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
会议时间：
2013-3-1
会议地点：
长沙
会议主办单位：
中南大学湘雅医院;中国当代儿科杂志社
会议论文集名称：
庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛论文集
关键词：
肺炎;支原体;膜蛋白质类;上皮细胞;支气管
摘要：
[目的]观察不同浓度肺炎支原体脂质相关膜蛋白(MP-LAMPs)对人支气管上皮细胞(HBEC)表达短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的影响,探讨SPLUNC1在呼吸道感染中的作用及肺炎支原体(MP)感染与SPLUNC1表达的量效关系及时效关系.[方法]通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测不同浓度的MP-LAMPs刺激HBEC后,在不同时间点(2h、4h、8h、16h及24 h)SPLUNC1基因表达的变化；同时用Western-blot检测0.5 μg/mL MP-LAMPs刺激HBEC后不同时间点SPLUNC1蛋白表达情况.[结果]正常人HBEC有SPLUNC1表达；在相同时间点,不同浓度的MP-LAMPs均能诱导SPLUNC1基因表达上调,其中0.5 μg/mL s浓度组表达量最高,不同浓度组间比较差异有统计学意义(P＜0.01)；在同一浓度组,MP-LAMPs刺激细胞2h后SPLUNC1基因及蛋白表达量开始上调,并在4h时达高峰,随着时间延长逐渐下降,不同时间点组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]MP-LAMPs能诱导HBEC的SPLUNC1基因表达上调,并成一定的剂量依耐性,其表达量最佳浓度和时间点为0.5 μg/mL MP-LAMPs刺激HBEC 4 h.
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肺炎支原体荚膜多糖与DC-SIGN结合并促进IL-10的分泌
作者：
刘紫玲;游晓星;彭志平;张慧丽;高顺利;...
期刊：
细胞与分子免疫学杂志 ,2013年29(1):10-13 ISSN：1007-8738
通讯作者：
Liu, Z.
作者机构：
[刘紫玲; 游晓星; 曾焱华; 余敏君; 朱翠明] 南华大学医学微生物学与免疫学教研室;[彭志平; 张慧丽] 包头市中心医院检验科;[高顺利] 南华大学附属第一医院
关键词：
肺炎支原体;荚膜多糖;树突状细胞
摘要：
目的研究肺炎支原体(Mp)荚膜多糖(CPS)与树突状细胞(DC)特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC-SIGN, CD209)的相互作用及其对未成熟DC(iDC)分泌IL-10和IL-12的影响。方法提取并纯化Mp的CPS和脂质相关膜蛋白(LAMPs),用间接免疫荧光检测CPS与DC-SIGN受体的作用;ELISA法检测CPS和LAMPs作用后iDC所分泌的IL-10,IL-12水平。结果间接免疫荧光可见Mp CPS可结合到DC表面,且DC-SIGN的特异性封闭抗体可阻断CPS与DC的结合;ELISA检测发现CPS与LAMPs共孵育可促进DC分泌IL-10(P<0.05),而IL-12的表达水平刺激前后无统计学的差异。结论Mp的CPS可识别并结合DC的DC-SIGN受体,并促进未成熟DC分泌IL-10。
语种：
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