以ABCA1为靶点防治动脉粥样硬化的新机制—ABCA1作为膜受体介导抗炎的新功能
项目作者：
唐朝克
项目作者单位：
南华大学
项目批准号：
81070220
资助经费：
33万
立项时间：
2011-01-01到2013-12-31
项目类别：
面上项目
项目来源：
国家自科基金项目
项目关键词：
动脉粥样硬化;三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1）;炎症
项目摘要：
(1)利用多种巨噬细胞模型，观察apoA1对LPS诱导的炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达的影响；利用siRNA干扰等技术观察apoA1处理后ABCA1、CDC42、PKA、ROK、STAT3和TTP表达和活性变化及对抗炎作用的影响；(2)构建ABCA1及相关突变体重组质粒，转染BHK细胞，采用免疫共沉淀等技术观察apoA1处理前后ABCA1与CDC42复合物的活性变化及对PKA/ROK/STAT3/TTP抗炎途径的影响，证实ABCA1作为CDC42相关膜受体介导抗炎并初步确定相关的结构域；本项目有望阐明ABCA1作为膜受体介导抗炎的直接效应和关键信号途径，发现apoA1/ABCA1结合后对胞内抗炎信号途径的调控规律，揭示ABCA1作为膜受体介导apoA1抗炎的结构基础，为以ABCA1为靶点防治动脉粥样硬化等慢性炎症疾病提供新的实验依据。
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小干扰RNA沉默Toll样受体4表达对慢性温和应激ApoE~(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞TLR 4/NF-κB途径基因表达的影响
作者：
顾洪丰;唐朝克;唐雅玲;覃丽;杨永宗
期刊：
中国动脉硬化杂志 ,2011年19(1):6-12 ISSN：1007-3949
作者机构：
南华大学心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001;南华大学生理学教研室,湖南省衡阳市,421001;南华大学药理学教研室,湖南省衡阳市,421001;[覃丽; 唐雅玲; 杨永宗; 唐朝克; 顾洪丰] 南华大学
关键词：
小干扰RNA;Toll样受体4;慢性温和应激;核因子κB;肿瘤坏死因子α
摘要：
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)沉默Toll样受体4(TLR4)基因对慢性温和应激ApoE-/-小鼠腹腔巨噬细胞促炎症细胞因子表达的影响.方法 针对小鼠TLR4基因设计2条siRNA和一条无关序列,再据每一序列合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-H1.1/Adeno相连,转染293A细胞,实时荧光PCR筛选有效的一条siRNA,经腺病毒颗粒包装与病毒扩增并感染293A细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,检测病毒滴度.120只雄性ApoE-/-小鼠随机分为三组:(1)慢性温和应激组;(2)慢性温和应激+siRNA组(10 μL/只,尾静脉注射,每5日一次);(3)慢性温和应激+腺病毒空载体组.每组ApoE-/-小鼠40只,实验动物都以高脂、高胆固醇饲料喂养,分别在接受慢性温和应激0、4、12周后3个时间点处死动物,收集小鼠腹腔单核巨噬细胞,以Western Blotting方法检测其TLR4和核因子κB(NF-κB)蛋白表达,ELISA法检测腹腔单核巨噬细胞培养上清液白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α表达.结果 转染siRNA1和siRNA2后的292A细胞中TLR4 mRNA表达水平较空白对照组分别下降56%和67%,逐孔稀释滴度测定法测定的病毒滴度为3.4×1014 TU/L;遭受4、12周慢性温和应激后,ApoE-/-小鼠血浆中皮质醇激素显著升高,但在同一时间点内,各组ApoE-/-小鼠血浆皮质酮激素浓度相比,差异没有统计学意义(P>0.05);与同一时期慢性温和应激组相比,siRNA组腹腔巨噬细胞TLR4和核因子κB蛋白表达水平明显降低 (均P<0.05),其培养细胞上清液中的白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α含量显著减少(P<0.01).结论 siRNA沉默TLR4基因能有效抑制TLR4 /NF-κB-IL-1β 和肿瘤坏死因子α的表达,提示TLR4/ NF-κB途径在慢性温和应激诱导的慢性炎症应答中可能有着重要作用.
语种：
中文
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The Effects of Highexpression and Knockdown Adipophilin in The Activity of ERK1/2 and Expression of PPAR_γ and Lipid Accumulation in Cells
作者：
Liu Qing-Nan;Dai Zhi-Bing;Liu Zhi-Qiang;Tang Chao-Ke;Tian Guo-Ping;...
期刊：
生物化学与生物物理进展 ,2011年38(12):1132-1144 ISSN：1000-3282
通讯作者：
Yuan Zhong-Hua
作者机构：
[Liu Zhi-Qiang; Tang Chao-Ke; Yuan Zhong-Hua; Liu Qing-Nan] Univ S China, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.;[He Qiu; Ye Ling; Liu Qing-Nan; Dai Xiao-Song] YiYang Med Coll, Dept Basic Nursing, Yiyang 413000, Peoples R China.;[Dai Zhi-Bing] Cent Hosp Yiyang, Dept Type Ultrason Diag B, Yiyang 413000, Peoples R China.;[Tian Guo-Ping] Univ S China, Affiliated Hosp 2, Dept Cardiovasc Med, Hengyang 421001, Peoples R China.
通讯机构：
[Yuan Zhong-Hua] U;Univ S China, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.
关键词：
adipophilin;extracellular signal-regulated kinase1/2;peroxisome proliferator-activated receptor gamma;retroviruses
摘要：
Our previous studies have showed that adipophilin promoted intracellular lipids accumulation through ERK1/2-PPAR gamma signaling pathway. In the study we explored that whether highexpression and knockdown adipophilin affects the activity of ERK1/2 and the expression of PPAR gamma and lipid accumulation in RAW264.7 cells, and further certified that adipophilin promoted intracellular lipids accumulation through this pathway. The recombinant retroviral vetors pQCXIP-HA-Adipophilin and pSuper-retro-adipophilin siRNA were verified by the methods of enzyme-digesting. The recombinant retroviral vetors were transfected into PA317 cell by mediating Sofast (TM), which can induce retroviruses release. Then we used the collected retroviruses to infect RAW264.7 cells and achieved adipophilin gene highexpression and knockdown RAW264.7 cell lines applying puromycin screening. After the infected RAW264.7 cells incubated with 50 mg/L Ox-LDL for 24 h, the lipids accumulation were measured by Oil red 0 staining and HPLC, the expression of mRNA and proteins of adipophilin and PPAR gamma were detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot respectively, and phosphorylation of ERK1/2 was analyzed by Western blot too. The results of enzyme-digesting confirmed the recombinant retroviral vectors pQCXIP-HA-Adipophilin and pSuper-retro-adipophilin siRNA as expected. In the situation of Dutch fat, transfected cells with pQCXIP-HA-Adipophilin significantly increased the accumulation of lipids, but reduced the expression of PPAR gamma and the phosphorylation of ERK1/2, which were reversed in cells with pSuper-retro-adipophilin siRNA transfection. Our results showed that ERK1/2 and PPAR gamma may be related with lipids accumulation caused by adipophilin expression in macrophages incubated with modified LDL. Therefore, adipophilin might contribute, in vivo, to lipid accumulation in the intima of the arterial wall through the ERK1/2-PPAR gamma signaling pathway.
语种：
英文
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小凹及小凹蛋白1介导炎症应答与胆固醇跨膜转运之间的相互作用
作者：
廖端芳;覃丽;唐朝克
期刊：
中国动脉硬化杂志 ,2011年(3):233 ISSN：1007-3949
作者机构：
湖南中医药大学中药粉体与创新药物国家重点实验室培育基地;南华大学药物药理研究所;南华大学生命科学研究中心
关键词：
小凹;小凹蛋白1;炎症反应;胆固醇逆向转运;动脉粥样硬化
摘要：
<正>胆固醇逆转运和炎症反应在动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的发生发展中发挥了重要作用。前者属于经典的脂质代谢理论,而后者属于现代免疫炎症学说。二者在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用仍然是学术界关注和争论的重要问题。基于我们的研究工作和文献归纳、整理,我们认为在动脉粥样硬化发生过程中,胆固醇跨膜转运与炎症反应之间相互影响、相
语种：
中文
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晚期氧化蛋白产物对apoE基因敲除小鼠ABCA1表达的影响
作者：
莫中成;尹凯;赵国军;欧阳新平;吕运成;...
作者机构：
[莫中成; 尹凯; 赵国军; 欧阳新平; 吕运成; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所动脉硬化湖南省重点实验室生命科学研究中心
会议名称：
传承与发展，创湖南省生理科学事业的新高——湖南省生理科学会2011年度学术年会
会议时间：
2011-12-02
会议地点：
中国湖南长沙
摘要：
<正>目的:以apoE基因敲除(apoE-KO)小鼠为研究对象,观察晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对apoEKO小鼠ABCA1表达及动脉粥样硬化病变的影响。方法:8周龄雄性apoE-KO小鼠以高脂/高胆固醇(15%猪油+0.25%胆固醇)饲料饲养,随机分为四组(每组10只)。对照组:隔天腹腔注射与实验组同等剂量的生
语种：
中文
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白细胞介素4与动脉粥样硬化
作者：
谈春芝;吴洁(综述);唐朝克(审校)
期刊：
中国动脉硬化杂志 ,2011年19(2):155-159 ISSN：1007-3949
作者机构：
[谈春芝; 唐朝克(审校)] 南华大学心血管病研究所生命科学研究中心;[吴洁(综述)] 南华大学附属第一医院心内科
关键词：
白细胞介素4;动脉粥样硬化;氧化应激;细胞凋亡;黏附分子;趋化因子
摘要：
血管内皮损伤与功能紊乱是动脉粥样硬化等心血管疾病的启动和进展因素。已有大量的研究表明，内皮细胞的氧化及炎症在动脉粥样硬化起始和进展中发挥重要作用。越来越多的证据表明白细胞介素4能够经由氧化应激上调炎性介质，如细胞因子、趋化因子和血管内皮细胞黏附分子。同时白细胞介素4能通过多种信号通路加速细胞凋亡，促进细胞内皮更新，这能够导致血管内皮功能失调。这些研究将极大可能为预防和治疗血管炎症性疾病如动脉粥样硬化等提供靶点及方向。
语种：
中文
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ApoAⅠ/ABCA1通过STAT3/TTP途径调节炎症因子mRNA降解
作者：
尹凯;莫中成;赵国军;姜津;崔立宝;...
期刊：
中国动脉硬化杂志 ,2011年(3):243-244 ISSN：1007-3949
作者机构：
南华大学心血管疾病研究所动脉硬化湖南省重点实验室生命科学研究中心;[崔立宝; 莫中成; 赵国军; 唐朝克; 姜津; 尹凯] 南华大学
关键词：
炎症因子
摘要：
目的观察ApoAⅠ对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子表达的影响,并从ABCA1介导激活的STAT3/TTP信号途径入手探讨其分子机制。方法采用ELISA检测炎症因子表达;构建含肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子的CAT报告基因,转染THP-1细胞,采用ELISA检测TNF-α启动子活性;定量PCR检测TNF-α等炎症因子mRNA表达;免疫印迹技术检测pSTAT3、TTP和HuR等蛋白表达;RNA-EMSA检测TTP与RNA复合物;构建TTP、STAT3 siRNA,转染细胞。结果用10μg/L LPS和/或10 mg/L ApoAⅠ处理THP-1源性泡沫细胞4 h,结果显示ApoAⅠ明显抑制LPS诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6的表达;CAT报告基因显示,ApoAⅠ并不明显影响LPS诱导的TNF-α启动子活性;LPS处理细胞3 h,加入放线菌素D(Act D)终止转录,检测TNF-αmRNA表达量(0、30、60及120 min),结果显示ApoAⅠ明显增加LPS作用下TNF-α的mRNA降解;ApoAⅠ明显促进LPS作用下TTP的表达,而对HuR的表达没有明显影响,TTP siRNA处理后明显抑制ApoAⅠ促进TNF-αmRNA降解的作用;RNA-EMSA结果显示,ApoAⅠ明显促进胞内蛋白与ARE探针形成复合物,加入TTP抗体形成su-pershift;ApoAⅠ处理THP-1细胞后迅速(15 min)磷酸化STAT3,核内STAT3表达增加,STAT1和STAT6不受影响;STAT3 siR-NA处理后明显抑制TTP的表达及TNF-αmRNA的降解;采用siRNA下调ABCA1的表达,明显抑制ApoAⅠ作用下TTP的表达及TNF-αmRNA的降解。结论 ApoAⅠ通过转录后调控方式抑制LPS诱导的炎症因子表达;ApoAⅠ促进TTP表达,并通过与炎症因子3′UTR ARE序列结合促进其mRNA降解;ApoAⅠ通过激活STAT3促进TTP表达,该效应直接受ABCA1介导。
语种：
中文
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急性期应答与胆固醇逆向转运
作者：
汤石林;唐朝克
期刊：
生命的化学 ,2011年31(3):438-441 ISSN：1000-1336
作者机构：
南华大学心血管病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,生命科学研究中心,衡阳,421001;南华大学附一医院ICU,衡阳,421001;[汤石林; 唐朝克] 南华大学
关键词：
急性期应答;胆固醇逆向转运;动脉粥样硬化;脂多糖;高密度脂蛋白
摘要：
胆固醇逆向转运（reverse cholesterol transport,RCT）是促进外周胆固醇从细胞内流出,然后转运到肝脏进行代谢的过程,是机体抗动脉粥样硬化相关疾病的重要机制。研究表明,感染、炎症及创伤等诱导的急性期应答（acute phase response,APR）影响高密度脂蛋白的结构和功能,抑制细胞内胆固醇流出、血浆胆固醇转运及肝脏胆固醇代谢和排泌等环节,因此抑制体内RCT。APR短期抑制RCT有利于机体抗感染和组织损伤,然而,APR对RCT的进一步抑制将促进外周组织胆固醇蓄积及代谢紊乱,可能是多种感染免疫性疾病、代谢性疾病与动脉粥样硬化呈正相关的关键因素。本文就APR调节机体RCT的最新研究进展作一综述。
语种：
中文
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小平台应激对小鼠吗啡场景特异性行为敏化的影响
作者：
欧阳新平;何平平;周钰娟;胡丽;顾洪丰;...
期刊：
医药前沿 ,2011年1(24):88-89 ISSN：2095-1752
作者机构：
南华大学生理学教研室认知与神经系统疾病研究所,421001;南华大学心血管疾病研究所,421001;南华大学护理学院,湖南衡阳,421001;南华大学生命科学研究中心,421001
关键词：
场景;小平台应激;吗啡;行为敏化;学习
摘要：
目的 检测小平台应激对吗啡诱导小鼠场景特异性行为敏化的影响.方法 观察当小鼠在熟悉场景获得吗啡而行为敏化表达检测在新颖场景进行时的小平台应激效应;以及当小鼠在新颖场景获得吗啡而行为敏化表述检测在吗啡配对场景及非配对场景进行时的小平台应教效应.结果 吗啡熟悉场景+应激组小鼠与吗啡熟悉场景组小鼠相比水平活动距离无显著性差异.吗啡配对+应激组小鼠比吗啡配对组小鼠水平活动距离呈著降低.而吗啡非配对+应激组小鼠水平活动距离比吗啡非配对组显著增加.结论 小平台应激对在熟悉场景给予吗啡的小鼠行为敏化没有显著性影响,而是损害小鼠吗啡场景特异性行为敏化.
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中文
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Synthetic LXR agonist T0901317 attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats
作者：
Wang, Deming;Liu, Meimei;Wang, Yongsheng;Luo, Min;Wang, Jiazheng;...
期刊：
International Immunopharmacology ,2011年11(12):2098-2103 ISSN：1567-5769
通讯作者：
Xiao, Ji
作者机构：
[Luo, Min; Dai, Changzong; Wang, Yongsheng; Yan, Ping; Wang, Deming; Wang, Jiazheng; Zhang, Xiongjun; Xiao, Ji; Wang, Yan] Univ S China, Affiliated Hosp 2, Dept Anesthesiol, Hengyang 421001, Hunan, Peoples R China.;[Liu, Meimei] Univ S China, Affiliated Hosp 2, Dept Paediat, Hengyang 421001, Hunan, Peoples R China.;[Liu, Meimei; Tang, Chaoke; Xiao, Ji] Univ S China, Life Sci Res Ctr, Key Lab Atherosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Res, Hengyang 421001, Hunan, Peoples R China.
通讯机构：
[Xiao, Ji] U;Univ S China, Affiliated Hosp 2, Dept Anesthesiol, Hengyang 421001, Hunan, Peoples R China.
关键词：
Acute lung injury;Cytokines;Lipopolysaccharide;Liver X receptors;T0901317
摘要：
Objective To investigate the potential role of synthetic liver X receptors (LXRs) agonists T0901317 in lung of rats with acute lung injury induced by lipopolysaccharide (LPS). Methods Rats infused with LPS served as acute lung injury (ALI) models. Specific mRNA was quantified by semi-quantitative reverse transcription polymerase (RT-PCR) and protein expression by western blotting. Inflammatory cytokine and MPO activity assays were studied by ELISA. Histopathology analysis was evaluated by hematoxylin and eosin. Results The expressions of LXRα and LXRβ were gradually decreased after LPS challenge. T0901317 pretreatment efficiently reduced the production of TNF-α, IL-1β, and IL-6, while elevated the level of IL-10 in BALF of rats with ALI. T0901317 also decreased the number of inflammatory cells and the concentration of total proteins in the BALF. Compared with the LPS group, rats with ALI which were pretreated with T0901317 had lower pulmonary tissue MPO activity and lightened histopathologic changes of lung. Furthermore, the expressions of NF-κB and ICAM-1 were markedly reduced after T0901317 administration. Conclusion The expressions of LXRs were significantly decreased and synthetic agonist T0901317 suppresses lung inflammatory responses and lightened histopathologic changes of lung in rats with ALI. The mechanisms of this action for T0901317 may associate with the inhibition of NF-κB activation and downregulation of adhesion molecules ICAM-1 gene. © 2011 Elsevier B.V.
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microRNAs———脂质代谢调控新机制
作者：
Chen Wu-Jun;Yin Kai;Zhao Guo-Jun;Tang Chao-Ke*
期刊：
生物化学与生物物理进展 ,2011年38(9):781-790 ISSN：1000-3282
通讯作者：
Tang Chao-Ke
作者机构：
[Chen Wu-Jun; Yin Kai; Zhao Guo-Jun; Tang Chao-Ke] Univ S China, Life Sci Res Ctr, Inst Cardiovasc Dis, Key Lab Atherosclerol Hunan Prov, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Chen Wu-Jun] Univ S China, Inst Pharm & Pharmacol, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Yin Kai] Univ S China, Dept Diagnost, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Zhao Guo-Jun] Univ S China, Dept Histol & Embryol, Hengyang 421001, Peoples R China.
通讯机构：
[Tang Chao-Ke] U;Univ S China, Life Sci Res Ctr, Inst Cardiovasc Dis, Key Lab Atherosclerol Hunan Prov, Hengyang 421001, Peoples R China.
关键词：
胆固醇稳态;脂肪酸氧化;甘油三脂代谢
摘要：
综述了近年来microRNAs，尤其是miR-33在脂质代谢调控方面的功能研究进展．脂质代谢在细胞水平进行有规律的调控，主要参与者有肝X受体(LXRs)和固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)等．最近研究发现，非编码RNAs家族成员 microRNAs在转录后水平调节脂质代谢相关基因表达，参与胆固醇、甘油三酯和脂肪酸代谢．其中miR-33可靶向沉默三磷酸脂苷结合盒(ABC)转运体家族成员ABCA1和ABCG1，抑制胆固醇流出和高密度脂蛋白(HDL)合成；通过靶向沉默脂肪酸 β-氧化相关基因，如CPT1A、CROT和HADHB表达，抑制脂肪酸氧化；还可沉默AMPK和RIP140的表达，影响甘油三酯代谢．其他microRNAs如miR-122、miR-370、miR-125a-5p、miR-27、miR-320等，也参与调控胆固醇、甘油三脂、脂肪酸代谢及脂肪细胞分化．
语种：
中文
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表没食子儿茶素没食子酸酯对脂多糖处理THP-1源性泡沫细胞ABCA1的影响及其机制研究
作者：
姜津;尹凯;莫中成;赵国军;崔立宝;...
期刊：
中国动脉硬化杂志 ,2011年(3):273 ISSN：1007-3949
作者机构：
南华大学心血管疾病研究所动脉硬化湖南省重点实验室生命科学研究中心
关键词：
表没食子儿茶素没食子酸酯;脂多糖;胆固醇流出
摘要：
目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脂多糖(LPS)处理的THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出及其ABCA1活性的影响,并探讨其机制。方法建立THP-1源性泡沫细胞模型,加入不同浓度LPS进行炎性刺激。在LPS刺激前1 h,加入不同浓度EGCG预处理。MTT法检测EGCG处理后细胞存活性。油红O染色观察细胞脂质蓄积。高效液相色谱法检测细胞胆固醇流出水平。实时定量PCR和Western blot法检测细胞内mRNA和蛋白质水平。EMSA检测细胞NF-κB活性。结果 EGCG预处理对细胞存活率不产生影响。不同浓度LPS处理细胞后,脂质蓄积增多胆固醇流出减少,而EGCG预处理减轻了脂质蓄积并且增加胆固醇流出率。LPS处理能够抑制细胞内ABCA1 mRNA和蛋白水平,而EGCG预处理能够显著衰弱LPS的抑制作用。LPS刺激后NF-κB活性增加,而EGCG预处理能够降低LPS诱导的NF-κB活性。结论 EGCG能够通过抑制NF-κB活性,来降低LPS对THP-1源性泡沫细胞ABCA1的抑制作用,促进细胞内胆固醇的流出。
语种：
中文
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D-4F抑制高脂喂养apoE-/-小鼠动脉粥样硬化及其炎症反应
作者：
尹凯;路倩;陈五军;赵国军;莫中成;...
作者机构：
[尹凯; 路倩; 陈五军; 赵国军; 莫中成; 姜津; 崔立宝; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所,动脉硬化湖南省重点实验室,生命科学研究中心
会议名称：
第八届海峡两岸心血管科学研讨会
会议时间：
2011-08-15
会议地点：
中国宁夏银川
摘要：
目的观察apoA1模拟肽D-4F对高脂喂养apoE′小鼠动脉粥样硬化(As)发生发展及血管炎症反应的调节作用。方法 48只雄性apoE′小鼠随机分为四组,每组12只,①基础组:小鼠8周末处死;②对照组:小鼠给予腹腔内注射PBS;③预防组:小鼠给予腹腔内注射D-4F(1mg·kg~1·d~1)14周;④治疗组:小鼠给予腹腔内注射PBS 8周,自第9周开始给予腹腔内注射D-4F(1mg.kg~1d~1
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流式细胞仪每秒进样细胞数对细胞周期分布的影响
作者：
唐国华;贺修胜;龙治峰;唐朝克
期刊：
中南医学科学杂志 ,2011年39(1):49-51 ISSN：2095-1116
作者机构：
南华大学,生命科学研究中心,湖南,衡阳,421001;南华大学,肿瘤所;南华大学,医学院;[龙治峰; 贺修胜; 唐国华; 唐朝克] 南华大学
关键词：
流式细胞仪;细胞周期
摘要：
目的 探讨流式细胞仪每秒进样细胞数对被检测细胞的细胞周期影响.方法 以鸡肝细胞为实验对象,采用不同的每秒进样细胞数检定其DNA含量.以MultiCycle for Windows分析软件分析G0/G1期、S期、G2/M期比值的变化.结果 G0/G1期细胞值方差分析显示,F=2.7,P＞0.05;S期细胞值方差分析,F=11.6,P＜0.05,G2/M期细胞值方差分析,F=17.4,P＜0.05.表明每秒进样细胞数不同,其细胞的S期、G2/M期比值之间的差异有显著性.结论 每秒进样细胞教影响细胞的S期、G2/M期比值,每秒进样细胞数以150～400个为宜.
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中文
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胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的转基因动物研究进展
作者：
肖继;廖端方;唐朝克
期刊：
岭南心血管病杂志 ,2010年16(1):58-62 ISSN：1007-9688
作者机构：
南华大学心血管病研究所,湖南衡阳,421001;南华大学药物药理研究所,湖南衡阳,421001;[肖继; 唐朝克; 廖端方] 南华大学
关键词：
动脉粥样硬化;胆固醇;动物,基因修饰;模型,动物;关键蛋白
摘要：
肝外组织获得的胆固醇通过胆固醇逆向转运（reverse cholesterol transport,RCT）回到肝脏排出体内。RCT起始于肝外组织细胞内胆固醇的流出,以胆固醇从肝脏分泌和粪便中排出体外结束。数个关键蛋白如三磷酸腺苷结合盒转运体A1/G1（adenotriphos binding cassette transporter A1/G1,ABCA1/G1）、卵磷脂胆固醇酰基转移酶（lecithin：cholesterolacyltransfer,LCAT）、胆固醇酯转移蛋白（cholesterol ester transfer protein,CETP）和B类Ⅰ型清道夫受体（scavenger receptor B1,SR-B1）参与了这个过程。本文综述RCT在心血管疾病中作用的转基因动物实验研究。这些动物和实验室资料对临床现象的解释和临床调查的未来方向可能有用。
语种：
中文
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高密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞B类Ⅰ型清道夫受体的表达及胆固醇流出的影响
作者：
莫中成;陈欣;谢远杰;赵国军;龙治峰;...
期刊：
实用医学杂志 ,2010年26(5):726-728 ISSN：1006-5725
作者机构：
南华大学组织胚胎学教研室,湖南省衡阳市,421001;[易光辉; 唐朝克; 陈欣] 心血管病研究所;[谢远杰; 莫中成; 龙治峰; 赵国军; 石金凤] 南华大学
关键词：
动脉粥样硬化;B类I型清道夫受体;高密度脂蛋白;胆固醇流出
摘要：
目的：观察高密度脂蛋白（HDL）对THP-1巨噬细胞B类Ⅰ型清道夫受体（SR-BI）的表达及胆固醇流出的影响。方法：用HDL及氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理THP-1细胞，采用RT-PCR、Western印迹及液体闪烁计数法观察细胞SR-BI的表达及细胞内胆固醇流出的变化。结果：ox-LDL下调THP-1巨噬细胞中SR-BI的表达，而HDL则上调THP-1巨噬细胞中SR-BI的表达：液体闪烁计数法检测发现OX—LDL减少细胞中胆固醇的流出，HDL可以增加细胞胆回醇的流出，且HDL的效应呈浓度依赖性。结论：HDL可能通过上调THP-1巨噬细胞SR-BI的表达．促进巨噬细胞内胆固醇流出。
语种：
中文
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Oxidized low-density lipoprotein activates adipophilin through ERK1/2 signal pathway in RAW264.7 cells
作者：
Liu, Qingnan;Dai, Zhibing;Liu, Zhiqiang;Liu, Xiaohui;Tang, Chaoke;...
期刊：
生物化学与生物物理学报 ,2010年42(9):635-645 ISSN：1672-9145
通讯作者：
Yuan, Zhonghua
作者机构：
[Tang, Chaoke; Liu, Qingnan; Jiang, Zhisheng; Yi, Guanghui; Liu, Lushan; Liu, Zhiqiang; Wang, Zuo; Liu, Xiaohui; Yang, Yongzong; Yuan, Zhonghua] Univ S China, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Dai, Zhibing] Univ S China, Inst Pathobiol, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Liu, Qingnan] YiYang Med Coll, Dept Basic Nursing, Yiyang 413000, Peoples R China.;[Dai, Zhibing] Cent Hosp Yiyang, Dept B Type Ultrason Diag, Yiyang 413000, Peoples R China.
通讯机构：
[Yuan, Zhonghua] U;Univ S China, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.
关键词：
adipophilin;ERK1;atherosclerosis;PPAR gamma
摘要：
It has been reported that oxidized low-density lipoprotein (Ox-LDL) can increase the expression of adipophilin. However, the detailed mechanisms are not fully understood. The aim of this study was to investigate the mechanism of Ox-LDL on adipophilin expression and the intracellular lipid droplet accumulation. A mouse macrophage-like cell line, RAW264.7, was used throughout, and it was found that Ox-LDL induced adipophilin expression in a dose-dependent manner. Moreover, Ox-LDL induced peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) expression and PPARγ-specific inhibitor T0070907 abrogated Ox-LDL-induced adipophilin expression, but specific agonist GW1929 not. Furthermore, Ox-LDL induced phosphorylation of ERK1/2, and ERK1/2-specific inhibition by PD98059 suppressed the Ox-LDL-induced PPARγ and adipophilin expression. The results showed that ERK1/2 or PPARγ-specific inhibition decreased the amounts of intracellular lipid droplets. Meanwhile, the PPARγ-specific agonist increased intracellular lipid droplets. These results suggested that Ox-LDL-induced increase in adipophilin level via ERK1/2 activation is one of the mechanisms of inducing greater amounts of intracellular lipid droplets in RAW264.7 cells, which indicated that adipophilin is involved in atherosclerotic progression. © The Author 2010.
语种：
英文
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血管健康促进机制与动脉粥样硬化
作者：
刘梅梅;肖继;唐朝克
期刊：
生命的化学 ,2010年30(5):783-787 ISSN：1000-1336
作者机构：
[刘梅梅; 肖继; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所;南华大学动脉硬化学湖南省重点实验室;南华大学生命科学研究中心;南华大学附属第二医院儿科;南华大学生命科学研究中心南华大学附属第二医院麻醉科,衡阳,421001
关键词：
动脉粥样硬化;内皮祖细胞;血管新生;胆固醇逆向转运
摘要：
脂蛋白经渗漏或有缺陷的血管内皮滞留于内皮下是动脉粥样硬化的始动过程.为了减少对血管壁的侵害和促进血管壁功能的恢复,三种主要的防御机制在维持心血管内环境稳态过程中发挥重要作用:即内皮组细胞修复内皮,血管新生,巨噬细胞介导的胆固醇逆向转运.本文根据这三大促进血管健康的机制与动脉粥样硬化的关系作一综述
语种：
中文
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脂多糖通过核因子-κB途径下调泡沫细胞ATP结合盒转运体A1的表达
作者：
Cao Dong-Li;Yin Kai;Mo Zhong-Cheng;Hao Xin-Rui;Hu Yan-Wei;...
期刊：
生物化学与生物物理进展 ,2010年37(5):540-548 ISSN：1000-3282
通讯作者：
Tang Chao-Ke
作者机构：
[Hao Xin-Rui; Yin Kai; Cao Dong-Li; Li Xiao-Xu; Tang Chao-Ke; Mo Zhong-Cheng; Hu Yan-Wei; Tang Ya-Ling] Univ S China, Life Sci Res Ctr, Key Lab Atherosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Res, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Cao Dong-Li] Anhui Unvers Sci & Technol, Coll Med, Dept Physiol & Pathophysiol, Huainan 232001, Peoples R China.
通讯机构：
[Tang Chao-Ke] U;Univ S China, Life Sci Res Ctr, Key Lab Atherosclerol Hunan Prov, Inst Cardiovasc Res, Hengyang 421001, Peoples R China.
关键词：
ATP结合盒转运体A1;脂多糖;肝X受体;胆固醇流出
摘要：
脂多糖(LPS)介导的免疫炎症反应与动脉粥样硬化(As)的发生密切相关, ATP结合盒转运体A1(ABCA1)促进细胞内胆固醇流出, 具有抗As作用.观察了LPS对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及胆固醇流出的影响, 并探讨TLR4/NF-κB信号途径和LXRs在此过程中的作用.THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度LPS处理或者用LPS作用不同时间, 以LPS单独或用NF-κB抑制剂对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基甲酮(TPCK)预处理细胞后再加入LPS处理.RT-PCR检测 ABCA1、TLR4和LXRαmRNA的表达, Western blot检测ABCA1、LXRα及核内NF-κB p65蛋白的表达, 液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出, 高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量.结果表明, LPS呈浓度和时间依赖性抑制ABCA1的表达, 而增加TLR4 mRNA和核内NF-κB p65蛋白的表达, LPS使泡沫细胞内胆固醇流出减少, 细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯增加, TPCK预处理后, LPS的这种作用被部分抑制, LXRα的表达不受LPS和TPCK的影响.这一结果提示, TLR4/NF-κB信号途径介导LPS对ABCA1表达及细胞内胆固醇流出的抑制作用, 而LPS对ABCA1表达的调控不通过LXRα途径
语种：
中文
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3种动物模型与人动脉粥样硬化病变病理形态学分析
作者：
刘录山;唐志晗;任重;唐雅玲;姜志胜;...
期刊：
中南医学科学杂志 ,2009年37(2):123-125 ISSN：2095-1116
作者机构：
南华大学,心血管病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南,衡阳,421001;[唐志晗; 唐雅玲; 刘录山; 任重; 唐朝克; 姜志胜] 南华大学
关键词：
动脉粥样硬化;斑块;动物模型;病理形态学;比较研究
摘要：
目的建立并比较不同动物模型动脉粥样硬化（As）病变的病理形态学特征。方法用高脂饮食喂养建立小型猪、新西兰兔、载脂蛋白（Apo）E-/-小鼠As模型。苏丹Ⅳ染色检测血管As病变大体形态,HE染色进行显微形态学分析。结果3种动物模型都在主动脉弓处病变最明显,其中小型猪较新西兰兔和ApoE-/-小鼠在腹主动脉的病变更加明显。显微形态学分析发现,3种动物模型与人As病变都存在着一定的差异。结论动物模型As病变在不同研究中能一定程度上代表人类As病变,并不能完全代替人类病变。
语种：
中文
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