作者： 廖永红;黄炼;李程;张朝晖

作者机构： 南华大学公共卫生学院预防医学系,湖南衡阳,421001;水口山有色金属有限责任公司职工医院,湖南衡阳,421513

会议名称： 全国卫生毒理学术研讨会

会议时间： 2014-12-01

会议地点： 北京

会议论文集名称： 全国卫生毒理学术研讨会论文集

关键词： 硫酸铍;内源性硫化氢;活性氧

摘要： 　　目的 采用非暴露式气管内滴注硫酸铍(BeSO4)染毒SD大鼠，并用内源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠(NaHS)和肺组织中内源性H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PPG)干预，探讨内源性H2S对BeSO4致大鼠肺组织损伤的作用及其机制。方法 将健康、无特定病原体(SPF级)、体重180±20g、雄性SD大鼠48只，随机分为对照组、BeSO4组、BeSO4+NaHS组和BeSO4+PPG组，每组12只。

语种： 中文

作者： 肖锡林;薛金花;廖力夫;肖明春;杜可杰;...

期刊： 南华大学学报(自然科学版),2014年(1):91-96 ISSN：1673-0062

作者机构： 南华大学 化学化工学院,湖南 衡阳,421001;南华大学 公共卫生学院,湖南 衡阳,421001;[肖明春; 薛金花; 邓昌爱; 何博; 杜可杰; 肖锡林; 廖力夫] 南华大学

关键词： 曙红Y;中性红;镉离子;能量转移荧光猝灭法

摘要： 在pH 7.9的BR缓冲液中,曙红Y-中性红和镉离子相互作用,在535 nm处荧光强度随着镉浓度的增加,体系的荧光逐渐降低,其荧光强度降低值和镉离子含量在一定范围内有相关关系.据此建立了一种测定痕量镉的曙红Y-中性红体系能量转移荧光猝灭新方法,并优化了实验条件.在优化的实验条件下,体系在535 nm处的荧光强度降低值与镉的摩尔浓度在1.6＆#215;10-8~3.2＆#215;10-6 mol/L范围内线性关系良好,其线性回归方程为：？F=936.60-2425.2c（＆#215;10-6mol/L）,相关系数r=0.998,检出限为4.7＆#215;10-9 mol/L,相对标准偏差是0.45%,加标回收率是90.75%.本方法操作简便、灵敏、选择性好,用于实际样品中镉的测定,其测定结果同石墨炉原子吸收法一致（t检验法）.

语种： 中文

作者： Wang, Jia-Cheng;Wang, Yong-Sheng;Rang, Wei-Qing;Xue, Jin-Hua;Zhou, Bin;...

期刊： Microchimica Acta,2014年181(9-10):903-910 ISSN：0026-3672

通讯作者： Wang, Yong-Song

作者机构： [Rang, Wei-Qing; Zhou, Bin; Wang, Yong-Song; Yin, Ji-Cheng; Qian, Qiu-Mei; Xue, Jin-Hua; Wang, Yong-Sheng; Liu, Lu; Wang, Jia-Cheng] Univ South China, Coll Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Wang, Yong-Song] U;Univ South China, Coll Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： Aptamer;Gold nanoparticles;8-Hydroxy-2 '-deoxyguanosine;Colorimetric sensing

摘要： We report on a sensitive and specific method for the visual and colorimetric detection of 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine (8-OHdG) in human urine by using the 8-OHdG-aptamer (Apt) as the recognition element. The aptamer was adsorbed on the surface of gold nanoparticles which enhances their stability. On addition of 8-OHdG, the conformation of the aptamer changes to form a G-quadruplex structure, thereby losing the ability to protect the nanoparticles and causing a color change from red to blue. The conformational changes were also studied by circular dichroism. The response is linearly dependent on the concentration of 8-OHdG in the range from 5.6 to 282 nM, the limit of detection is 1.7 nM, the relative standard deviation ranges from 1.1 to 4.2 % (for n = 6), and the recoveries range from 95.9 to 104.9 %. The method paves the way for visual analysis of samples without the use of costly instruments. [Figure not available: see fulltext.] © 2014 Springer-Verlag Wien.

语种： 英文

作者： 李秋;李贵荣;刘长鹤;韩倩

期刊： 应用化工,2014年43(4):755-758 ISSN：1671-3206

作者机构： [李秋; 李贵荣; 刘长鹤; 韩倩] 南华大学公共卫生学院

关键词： 浊点萃取;比值导数分光光度法;孔雀石绿;结晶紫

摘要： 建立一种浊点萃取-比值导数光度法同时测定水样中孔雀石绿和结晶紫,测量波长分别为639,476 nm,线性范围都是1.0×10~(-8)~1.0×10~(-6)mol/L,检测限分别是3.93×10~(-9),4.96×10~(-9)mol/L。相对标准偏差分别小于4.08%和4.31%。该方法应用于测定水样中痕量孔雀石绿和结晶紫,结果令人满意。

语种： 中文

作者： 贺丽;李纯颖;李紫;邹学敏;吴成秋

期刊： 实用预防医学,2014年20(3):264-266 ISSN：1006-3110

作者机构： 南华大学公共卫生学院,湖南衡阳,421001;[邹学敏] 长沙医学院;[李紫; 李纯颖; 吴成秋; 贺丽] 南华大学

关键词： 镍;铬;联合作用;睾丸;生殖毒性;小鼠

摘要： 目的观察镍与铬对小鼠睾丸的联合毒作用,探讨镍、铬联合作用类型及毒作用机制。方法54只昆明种雄性小鼠按3×3析因设计随机等分为9组,镍染毒剂量为0.0,2.5、5.0mg/kg·bw、铬染毒剂量为0.0、2.5、5.0 mg/kg·bw,按0.1 ml/10 g·bw连续灌胃5d,35d后处死动物,检测睾丸脏器系数、睾丸结构、睾丸细胞凋亡及细胞周期;精子数量、活力和畸型;检测睾丸组织中MDA含量、SOD、LDH、SDH活性。结果小鼠睾丸脏器系数、SOD、LDH、SDH活性随染毒剂量增加而降低,MDA含量增高（P【0.01）,且有量一效关系;精子数量较对照组低（P【0.01）、精子活力下降（P【0.01）、畸形率高于对照（P【0.01）,睾丸的结构受损,各染毒组小鼠睾丸细胞凋亡率和G₀/G₁期细胞百分数较对照组升高（P【0.05）,各染毒组s期及G₂+M期细胞百分数较对照组低（P【0.05）,并呈现一定的量一效关系,镍、铬合用的效应大于二者单独作用的效应之和（P【0.01）。结论镍和铬联合染毒可致小鼠睾丸损伤,二者的联合作用为协同毒效应;损伤机制可能与其降低睾丸细胞的抗氧化能力、抑制睾丸细胞酶活性、促进睾丸细胞凋亡等有关。

语种： 中文

作者： 肖方竹

期刊： 山西医科大学学报,2014年(3):253 ISSN：1007-6611

作者机构： 南华大学公共卫生学院;[肖方竹] 南华大学

关键词： 公共卫生学;预防医学;南华;医学院;大学;专修科;院前;衡阳;合并组建;校时

摘要： <正>南华大学公共卫生学院前身为衡阳医学院建校时所创办的卫生学专修科,1994年成立预防医学系,2000年中南工学院和衡阳医学院合并组建南华大学时由系升为学院,更名为公共卫生学院。学院下设预防医学系、

语种： 中文

作者： 杨艳丽;张士猛;周平坤

期刊： 中华放射医学与防护杂志,2014年34(7):551-554 ISSN：0254-5098

作者机构： 南华大学公共卫生学院环境医学与放射卫生研究所, 衡阳,421001;[张士猛; 周平坤] 军事医学科学院放射与辐射医学研究所;[杨艳丽] 南华大学

关键词： DNA损伤;蛋白激酶催化亚单位;应答反应;DNA依赖蛋白激酶催化亚基;辐射诱导;依赖型;磷脂酰肌醇3-激酶

摘要： 哺乳类细胞基因组DNA损伤会迅速引发DNA损伤反应（DNA damage response,DDR）,这一反应涉及一系列复杂DNA损伤信号传导、分子变化和细胞学应答.有些很重要的DNA损伤反应蛋白能参与多个细胞学反应的调控,发挥交叉耦联分子的作用.DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）是DNA双链断裂的非同源末端连接修复途径的关键组分,属于磷脂酰肌醇3-激酶家族成员,近年来的研究发现其在DNA损伤的早期信号过程、修复、细胞周期检查点、有丝分裂调节及凋亡等一系列DNA损伤应答反应中起重要作用.本文就DNA-PKcs在DNA损伤应答中的作用机制研究进展进行了综述.

语种： 中文

作者： 姜晶;高露;黄波;周平坤;让蔚清

期刊： 中华放射医学与防护杂志,2014年34(4):250-254 ISSN：0254-5098

作者机构： [姜晶; 高露; 黄波; 让蔚清] 南华大学公共卫生学院环境医学与放射卫生研究所;[周平坤] 军事医学科学院

关键词： 放射工作人员;电离辐射;染色体畸变;微核细胞;Meta分析

摘要： 目的用Meta分析的方法综合定量分析电离辐射对职业暴露人群染色体畸变率和微核细胞率的影响。方法全面检索国内外中英文相关文献,按预先设定的纳入排除标准进行严格筛选后,最终纳入21篇文献,总研究细胞数1 970 626个。用Stata 12. 0进行Meta分析,异质性检验用检验和I_2统计量,发表偏倚用漏斗图法、Begg秩相关法和Egger线性回归法3种方法识别。结果放射工作人员发生染色体型畸变、双着丝粒体+环状染色体畸变、易位、微核细胞的危险性要高于非放射工作人员,其比值比及95%的可信区间分别为3. 03 (2. 59,3. 56)、4. 12 (2. 99,5. 67)、2.73 (1.67,4. 46)、1.70 (1.40,2.06)。结论长期暴露在低剂量电离辐射下会显著增加外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核细胞率,应加强放射工作人员的辐射防护。

语种： 中文

作者： 肖双;魏传杰;唐凯玲;李盛;龙鼎新

期刊： 实用预防医学,2014年21(5):513-516 ISSN：1006-3110

作者机构： 南华大学公共卫生学院,湖南衡阳,421001;[唐凯玲; 龙鼎新; 肖双; 李盛; 魏传杰] 南华大学

关键词： SH-SY5Y细胞;钙蛋白酶;盐酸维拉帕米;二苯基硼酸-2-氨基乙酯

摘要： 目的 研究三邻甲苯磷酸酯(TOCP)对人成神经瘤细胞(SH-SY5Y) calpain活性的影响.方法 用全反式维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化,用不同浓度的TOCP(0、0.25、0.5、1.0 mM)染毒未分化或分化的SH-SY5Y细胞不同时间(12、24、48 h),用20 μM盐酸维拉帕米(verapamil)和100 μM二苯基硼酸-2-氨基乙酯(2-APB)预处理细胞15 min后染毒TOCP 1.0 mM48 h,采用荧光分光光度法测calpain活性.结果 随着染毒浓度和时间的增加,TOCP活化未分化与分化的SH-SY5Y细胞calpain活性(P＜0.05),钙通道抑制剂verapamil和2-APB预处理细胞能抑制TOCP引起的calpain活性升高(P＜0.05).结论 TOCP通过SH-SY5Y细胞内钙紊乱而活化calpain活性.

语种： 中文

作者： 韩明林;李钢强;孙晓宇

期刊： 卫生软科学,2014年28(4):222-224 ISSN：1003-2800

作者机构： 南华大学公共卫生学院;[李钢强] 湖南省卫生厅;[孙晓宇] 卫生部医院管理研究所;[韩明林] 南华大学

关键词： 学习型医院;核心竞争力;医院管理

摘要： 近几年来,随着医学技术水平的不断发展,学习型医院的概念应运而生,并随着时代的发展而受到高度重视.学习型医院其意义在于对整个医院学习创新氛围的营造以及通过学习能力提高医院核心竞争力,达到医院的持续性发展.

语种： 中文

作者： 吴铁钢;张天成;李贤;曾柳;路庆;...

期刊： 现代医院,2014年14(10):80-82 ISSN：1671-332X

作者机构： 南华大学公共卫生学院;[高栋] 南华大学附属南华医院;[路庆; 吴铁钢; 张天成; 曾柳; 李贤] 南华大学

关键词： 脑出血;住院费用;神经网络

摘要： 目的 分析脑出血单病种住院费用的构成及影响因素,提出控制单病种住院费用不合理增长的措施和建议.方法 以衡阳市1所三级甲等医院2012～2013年442例脑出血住院患者的费用数据为样本,建立神经网络模型分析住院费用影响因素的敏感度,并对影响人均住院费用的重要因素进行单因素方差分析(one-way ANOVA).结果 影响脑出血患者住院费用的主要因素的为住院天数(0.519)、是否手术(0.167)、年龄组(0.123)和付费类型(0.073).结论 通过政策、技术等多种方式的综合运用才能有效地降低药费和缩短住院天数,并最终控制单病种住院费用的不合理增长.

语种： 中文

作者： 曾柳;张天成;李贤;吴铁钢;路庆

期刊： 现代医院,2014年14(1):90-93 ISSN：1671-332X

作者机构： 南华大学公共卫生学院 湖南衡阳 421001;[路庆; 吴铁钢; 张天成; 曾柳; 李贤] 南华大学

关键词： 医药分开;公立医院;门诊患者;效果评价

摘要： 目的 了解北京市公立医院门诊患者对医药分开政策的态度、效果感知及对医疗服务的满意程度,以期为医药分开政策的顺利实施与推广提供基础依据和政策建议.方法 采用调查问卷的形式对北京市5所试点医院的325名门诊患者进行了调查,并运用SPSS软件对数据进行了详细分析.结果 患者对医药分开政策的知晓率为57.6％;对取消药品加成和设医事服务费的支持率分别为82.28％和43.04％;认为医药分开政策效果不明显或没有效果的占72.78％.此外,改革后患者的总体满意度较高,其中服务态度和医疗效果满意度最高,就诊时间和医疗费用满意度较低.结论 医药分开政策能在一定程度上降低医药费用,引导患者合理就医,和谐医患关系,但还需进一步加强其它配套措施的改革,以保障政策的顺利实施和推广.

语种： 中文

作者： 关端俐;周良荣;刘艺臻;唐峻炜

期刊： 中国初级卫生保健,2014年28(2):23-25 ISSN：1001-568X

作者机构： 南华大学公共卫生(管理)学院 湖南 衡阳421001;湖南中医药大学管理与信息工程学院 长沙410208;[关端俐; 刘艺臻; 唐峻炜] 南华大学;[周良荣] 湖南中医药大学

关键词： 新型农村合作医疗;支付方式;改革;患者满意度

摘要： 目的 对蓝山县和桑植县进行新型农村合作医疗支付方式改革后的患者进行满意度调查,了解改革的实际效果.方法 运用抽样调查方法,对2个县支付方式改革的总体情况进行调查,并对部分乡镇卫生院、医务人员及患者进行问卷调查和深入访谈.结果 住院患者对卫生院的新型农村合作医疗政策、诊疗水平以及服务态度的满意度不断提高,农民参合的积极性大幅度增长.结论 进一步优化政策设计,有效防范医患道德风险,建立良好的激励机制,加大对偏远地区卫生院的财政投入,以提高医疗服务能力.

语种： 中文

作者： 曹芳;朱茂祥;杨陟华;潘秀颉;贺性鹏

期刊： 中国公共卫生,2014年30(2):239-241 ISSN：1001-0580

作者机构： 南华大学公共卫生学院,湖南衡阳,421001;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;[潘秀颉] 潘秀颉;[杨陟华] 杨陟华;[曹芳] 曹芳

关键词： 铀矿尘;巨噬细胞;凋亡;抗氧化剂

摘要： 目的探讨N-乙酰半胱胺酸(NAC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘露醇4种抗氧化剂对铀矿尘致巨噬细胞损伤的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、荧光显微镜及化学/荧光发光仪检测不同浓度铀矿尘处理巨噬细胞后细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)以及还原型谷胱甘肽(GSH)水平变化;采用annexinV/PI双染法检测4种抗氧化剂对铀矿尘致巨噬细胞凋亡的保护作用。结果与对照组比较，铀矿尘染毒组巨噬细胞存活率下降，胞内ROS含量上升，GSH 水平下降，呈时间-剂量效应关系(P < 0.05); 抗氧化剂 NAC、CAT、SOD、甘露醇孵育后，与对照组比较，NAC 和甘露醇组巨噬细胞存活率[分别为(89.00 ± 0.95)%、(85.87 ± 2.20)%]明显升高，ROS 含量[分别为(3.87 ± 0.41)、(6.47 ± 0.99)]下降，GSH 水平[分别为(22.81 ±2.90)、(21.20 ± 2.85)]升高(P < 0.05)。结论NAC 和甘露醇对铀矿尘致巨噬细胞损伤具有保护作用并明显优于CAT 与SOD。

语种： 中文

作者： Ding, Dexin*;Fu, Pingkun;Li, Le;Xin, Xin;Hu, Nan;...

期刊： Journal of Radioanalytical and Nuclear Chemistry,2014年299(3):1903-1909 ISSN：0236-5731

通讯作者： Ding, Dexin

作者机构： [Ding, Dexin; Li, Guangyue; Hu, Nan; Xin, Xin; Fu, Pingkun] Univ South China, Key Discipline Lab Natl Def Biotechnol Uranium Mi, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Li, Le] Univ South China, Sch Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Ding, Dexin] U;Univ South China, Key Discipline Lab Natl Def Biotechnol Uranium Mi, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： Sodium feldspar;U(VI) ion adsorption;Low concentration aqueous solution;Kinetic;Water treatment

摘要： The raw sodium feldspar (RSF) is activated with the concentrated sulfuric acid solution and the acid activated sodium feldspar (AASF) is obtained. The results obtained from the mercury intrusion method show that the acidification can increase the porosity and the specific surface area. The effects of the initial pH, contact time and ambient temperature on the adsorption of U(VI) ions are investigated in a batch process. The adsorption efficiency amounts to the highest at pH 6 and the adsorption equilibrium is reached in 600 min. The pseudo-second-order model is found to be more suitable for the adsorption process than the pseudo-first-order model and intra-particle model, indicating that the chemical adsorption is the predominant step for the adsorption process. Langmuir model is found to describe the adsorption process better than Freundlich model. This proves that the main form of U(VI) ions attached to RSF and AASF is the monolayer coverage. The thermodynamic parameters prove that the adsorption process is a spontaneous endothermic one. It was also found that acid activated treatment can help increase the adsorption rate and capacity. The results show that RSF and AASF can be used as a novel low cost adsorbent for removal of U(VI) ions from the low concentration aqueous solution.

语种： 英文

作者： Liu, Hui;Wang, Yong-Sheng*;Wang, Jia-Cheng;Xue, Jin-Hua;Zhou, Bin;...

期刊： Analytical Biochemistry,2014年458:4-10 ISSN：0003-2697

通讯作者： Wang, Yong-Sheng

作者机构： [Zhou, Bin; Chen, Si-Han; Li, Ming-Hui; Tang, Xian; Cao, Jin-Xiu; Zhao, Hui; Liu, Hui; Liu, Shan-Du; Xue, Jin-Hua; Wang, Yong-Sheng; Wang, Jia-Cheng] Univ South China, Coll Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Wang, Jia-Cheng] Dali Univ, Coll Publ Hlth, Dali 671000, Peoples R China.

通讯机构： [Wang, Yong-Sheng] U;Univ South China, Coll Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： 8-Hydroxy-2'-deoxyguanosine;Colorimetric aptasensor;Conformational switching;G-quadruplex;Hemin

摘要： A highly sensitive, low-cost colorimetric aptasensor was developed for the determination of 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine (8-OHdG) in human urine. The method is based on a conformational switching of the 8-OHdG aptamer to form a G-quadruplex structure in the presence of 8-OHdG. The resulting G-quadruplex assembles into a peroxidase-like DNAzyme with hemin, which effectively catalyzes the oxidation of 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS2-) by H2O2 to ABTS +, resulting in an increase in the absorption signal at 416 nm along with a color change of the solution. The response signals linearly correlated with the concentration of 8-OHdG, ranging from 466 pM to 247 nM with a detection limit of 141 pM. The relative standard deviation and the recovery were 1.97-3.47% (n = 11) and 98.8-100.2%, respectively. The proposed method avoids the label and derivatization steps in common methods and allows direct analysis of the samples by the naked eye without costly instruments, which is reliable, inexpensive, and sensitive. © 2014 Elsevier Inc. All rights reserved.

语种： 英文

作者： 徐东方;陈新;邵秀贞

期刊： 中国护理管理,2014年14(8):858-861 ISSN：1672-1756

作者机构： [徐东方; 陈新; 邵秀贞] 南华大学公共卫生学院社会医学与卫生事业管理教研室

关键词： 县级医院;护理人员;离职意愿;职业生命质量

摘要： 目的：探讨县级医院护理人员离职意愿与职业生命质量(QWL7-32)之间的关系。方法：采用基本情况调查表、离职意愿量表及职业生命质量量表对湖南省邵阳市5所县级医院共438名护理人员进行问卷调查。结果: 离职意愿总分为(15.67±3.13)分；不同学历、任职方式、职务护理人员离职意愿总分比较差异无统计学意义（P >0.05）。而不同年龄、婚姻状况、工作年限、值夜班情况、月均收入护理人员离职意愿总分比较，差异有统计学意义（P <0.05）；离职意愿总分与职业生命质量总分及各维度得分之间呈负相关（P <0.05）。结论：县级医院护理人员离职意愿处于较高水平，不同特征的护理人员离职意愿之间存在着不同；护理人员离职意愿与职业生命质量之间存在着密切的关系，提升护理人员职业生命质量，可以有效降低其离职意愿。

语种： 中文

作者： 肖锡林;薛金花;廖力夫;贺冬秀;王芳;...

期刊： 分析仪器,2014年(6):24-29 ISSN：1001-232X

作者机构： 南华大学化学化工学院，南华大学公共卫生学院，衡阳 421001;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,南昌,330004;[薛金花; 何博; 王芳; 肖锡林; 贺冬秀; 廖力夫] 南华大学;[袁金斌] 江西中医学院

关键词： 曙红Y;中性红;铜;同步荧光猝灭

摘要： 在pH8.5的T ris－HCl缓冲液中，曙红Y －中性红和Cu（Ⅱ）相互作用，在538nm处随着Cu（Ⅱ）浓度的增加，体系同步荧光强度逐渐降低，同步荧光强度降低值和Cu（Ⅱ）含量在一定范围内有相关关系。据此应用中性红－曙红Y同步荧光猝灭法建立一种测定铜的新方法。在优化的实验条件下，体系在538nm处的荧光强度降低值与铜的摩尔浓度在7.61＆#215;10－8－3.60＆#215;10－6 mol ＆#183; L －1范围内线性关系良好，其线性回归方程为：△ F＝－0.414＋314.89c（＆#215;10－6 mol ＆#183; L －1），相关系数 r＝0.998，检出限为2.48＆#215;10－8 mol ＆#183; L －1，相对标准偏差是0.26％，加标回收率是101.12％。本方法操作简便、灵敏、选择性好，可用于实际样品中铜的测定。

语种： 中文

作者： 魏传杰;肖双;江岚;谭琰;黄波;...

期刊： 生物医学工程学杂志,2014年31(5):1085-1089 ISSN：1001-5515

作者机构： 南华大学 公共卫生学院,衡阳421001;[龙鼎新; 肖双; 谭琰; 江岚; 黄波; 魏传杰] 南华大学

关键词： G418筛选;细胞克隆

摘要： 为了构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体,并建立Beclin1稳定沉默的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系,将合成的shRNA片段连接pGenesil-1质粒,构建成重组质粒pGenesil-1-Beclin1,转化其至感受态大肠杆菌JM109,挑取阳性克隆进行双酶切和DNA测序鉴定.常规培养SH-SY5Y细胞,将重组质粒pGenesil-1-Beclin1和空白对照质粒pGenesil-1转染SH-SY5Y细胞,G418抗性筛选,在荧光显微镜下挑取单细胞克隆并扩大培养至稳定细胞株,经RT-PCR和Western blot检测Beclin1基因的表达.经酶切和DNA测序鉴定重组真核表达载体构建正确,成功筛选出两株细胞系.和对照组转染pGenesil-1的细胞系相比,转染pGenesil-1-Beclin1细胞系的Beclin1 mRNA表达下降71.28％±1.45％ (P＜0.05),Beclin1蛋白表达下降75.50％±2.63％ (P＜0.05).提示已经成功构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体并建立了Beclin1基因稳定沉默的SH-SY5Y细胞系,为研究Beclin1功能提供了细胞模型.

语种： 中文

作者： Long, Ding-Xin;Hu, Dan;Wang, Pan;Wu, Yi-Jun*

期刊： Molecular and Cellular Biochemistry,2014年396(1-2):33-40 ISSN：0300-8177

通讯作者： Wu, Yi-Jun

作者机构： [Wang, Pan; Wu, Yi-Jun; Long, Ding-Xin] Chinese Acad Sci, Inst Zool, Mol Toxicol Lab, State Key Lab Integrated Management Pest Insects, Beijing 100101, Peoples R China.;[Hu, Dan; Long, Ding-Xin] Univ South China, Sch Publ Hlth, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Wu, Yi-Jun] Chinese Acad Sci, Inst Zool, Mol Toxicol Lab, State Key Lab Integrated Management Pest Insects, 1-5 Beichenxi Rd, Beijing 100101, Peoples R China.

通讯机构： [Wu, Yi-Jun] C;Chinese Acad Sci, Inst Zool, Mol Toxicol Lab, State Key Lab Integrated Management Pest Insects, 1-5 Beichenxi Rd, Beijing 100101, Peoples R China.

关键词： Tri-ortho-cresyl phosphate;Autophagy;Programmed cell death;LC3;Beclin 1

摘要： Tri-ortho-cresyl phosphate (TOCP) is an organophosphorus ester and has been widely used in industry. It is found that TOCP induced delayed neurotoxicity in humans and sensitive animal species. However, the mechanism of TOCP-induced neural cytotoxicity remains unclear. In this study, we studied whether autophagy is involved in TOCP-induced neural cytotoxicity in human neuroblastoma SH-SY5Y cells. We found that 0.5 and 1.0 mM TOCP treatment significantly increased the ectopic accumulation of microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3)-immunopositive puncta, Beclin 1, and LC3-II/LC3-I levels in SH-SY5Y cells in a dose-dependent manner. Notably, by monodansylcadaverine staining method, we found abundant punctate fluorescent acidic vesicular organelles in TOCP-treated cells. Furthermore, ultrastructural observation under the transmission electron microscope indicated that the cytoplasm was occupied by autophagosomes in TOCP-treated SH-SY5Y cells. Thus, these results suggest that TOCP may induce autophagy, and autophagy may be involved in the development of TOCP-induced neural cytotoxicity.

语种： 英文