作者： 谭力铭;张蒙夏;罗红梅;曾勇智;李剑敏;...

期刊： 中华血液学杂志,2004年25(5):273-276 ISSN：0253-2727

通讯作者： Tan, L.M.

作者机构： [谭力铭; 曾勇智; 李剑敏; 崔泽文; 唐圣松] 南华大学药物药理研究所;[张蒙夏; 罗红梅; 张晓红] 南华大学医学院;南华大学药物药理研究所 421001湖南省衡阳市

关键词： 有丝分裂素激活蛋白激酶类;HL-60 细胞;细胞周期;二烯丙基二硫

摘要： 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)诱导HL-60细胞G2/M期细胞生长阻滞的分子机制.方法用不同浓度的DADS处理HL-60细胞,分别作用0,6,12,24,48 h后用MTT法测定细胞增殖活性;用流式细胞术和有丝分裂指数测定细胞增殖周期;用Western blot检测p38丝裂原活化蛋白(p38 MAPK)及Cdc25B和Cdc2激酶的表达和磷酸化水平;用RT-PCR检测p38 MAPK mRNA的表达.结果 DADS抑制HL-60细胞增殖呈浓度依赖性,且DADS(20 μmol/L)与ATRA(10 nmol/L)对HL-60细胞增殖活性影响相近(P>0.05);DADS 20 μmol/L作用HL-60细胞12 h后能引起G2/M期细胞百分数增高并达到最大值,而此时有丝分裂指数明显下降(P<0.05);同时,磷酸化p38 MAPK蛋白及p38 MAPK mRNA的表达达到高峰(P<0.05), 并引起Cdc25B和Cdc2磷酸化水平的相应变化.而p38特异性抑制剂SB202190(10 μmol/L)能阻断DADS对HL-60细胞增殖的抑制作用(P<0.05).结论 DADS能启动HL-60细胞G2/M控制点,它的激活可能与磷酸化p38MAPK的活化有关.

语种： 中文

作者： 郭玉;廖端芳;朱炳阳;唐圣松

期刊： 细胞与分子免疫学杂志,2004年20(1):34-37 ISSN：1007-8738

通讯作者： Guo, Y.

作者机构： [郭玉; 廖端芳; 朱炳阳; 唐圣松] 南华大学药物药理研究所;南华大学药物药理研究所 湖南衡阳421001

关键词： 噬菌体随机多肽文库;受损的内皮细胞;细胞黏附

摘要： 目的:筛选抗内皮细胞与单核细胞黏附的活性多肽.方法:①以氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL, 100 mg/L) 损伤的内皮细胞作为筛选的"靶"细胞, 从XCX15肽文库(X代表随机氨基酸, C为半胱氨酸, X15代表编码随机15肽)中, 筛选能与受损内皮细胞特异性结合的多肽. ②用ELISA法鉴定部分阳性克隆, 经DNA序列测定确定其插入的氨基酸序列. ③以计数法检测特异性噬菌体多肽对内皮细胞与单核细胞黏附率的影响.结果:①从挑选鉴定的14个克隆中, 得到6个阳性克隆, 测序结果有两个克隆的外源多肽序列相同, 4个克隆的外源多肽中含有亮氨酸-亮氨酸重复序列. ②两个序列相同的克隆的噬菌体多肽, 能明显降低内皮细胞与单核细胞的黏附率(分别降低17.0%和17.6%, P < 0.01, n = 4).结论:从XCX15肽文库中, 初步鉴定出1个具有较明显地抗内皮细胞与单核细胞黏附作用的活性多肽.

语种： 中文

作者： 唐圣松;陈桂彬;饶青;耿以琪;吴克复

期刊： 中华病理学杂志,2002年31(3):240-244 ISSN：0529-5807

作者机构： [唐圣松; 耿以琪; 陈桂彬; 饶青; 吴克复] State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute Of Hematology, Peking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Sciences, Tianjin, 300020, China

关键词： 巨噬细胞集落刺激因子受体;表达;巨噬细胞集落刺激因子;白血病;细胞系

摘要： 目的探讨巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSF-R)在人白血病细胞系中的表达及其作用.方法采用ABC免疫酶标技术、间接免疫荧光染色、流式细胞计数和蛋白免疫印迹研究了4株人白血病细胞系(J6-1、J6-2来源于人粒-单型白血病,HL-60为来源于人急性粒细胞白血病的髓样细胞系, K562为来源于人慢性白血病急变期胸水的髓样细胞系)和正常人外周血单个核细胞及正常人脐带血单个核细胞M-CSF-R的分布、表达、分子大小及其作用.结果正常人外周血单个核细胞未见M-CSF-R的表达,经PHA刺激后有低水平的表达;4株人白血病细胞系都高表达M-CSF-R,分布于细胞膜、细胞质和细胞核;J6-1、J6-2、K562和HL-60细胞质和胞核M-CSF-R(M-CSF-cnR)平均阳性率分别为52.3%、44.3%、28.0%、65.3%;胞膜M-CSF-R(M-CSF-mR)阳性率分别为78.9%、72.0%、54.9%、58.0%; 高于正常人外周血单个核细胞的表达水平.HL-60细胞质和胞核中有一种相对分子质量为120 000的 M-CSF-R分子;4种白血病细胞表达的M-CSF-cnR的半衰期分别高于正常人脐带血单个核细胞经PHA诱导表达的M-CSF-cnR的半衰期;J6-1、J6-2、HL-60细胞表达的M-CSF-mR的半衰期亦明显延长.抗M-CSF-R单抗和人重组的M-CSF-R可溶性受体均能使4种白血病细胞的增殖阻断在G0/G1期,并能抑制其在软琼脂上形成集落的能力.结论 M-CSF-R在人白血病细胞系的表达呈异质性; 胞内M-CSF-R的蓄积可能是白血病细胞M-CSF-R降解速率下降的结果,也可能是白血病细胞增殖的内源信号;M-CSF-R介导的信号是HL-60细胞增殖的重要和必需信号.

语种： 中文

作者： 郭玉;王芳宇;唐圣松;廖端芳

期刊： 中南医学科学杂志,2001年29(06):535-538 ISSN：2095-1116

作者机构： 南华大学药物药理研究所;南华大学生物化学教研室;南华大学药物药理研究所 湖南衡阳421001;[唐圣松; 郭玉; 廖端芳; 王芳宇] 南华大学

关键词： 噬菌体多肽文库;生物淘选法;内皮细胞

摘要： 目的　筛选与受损内皮细胞特异性结合的短肽。方法　以氧化型低密度脂蛋白 （oxidizedlowdensitylipoprotein ,ox -LDL）损伤牛胸主动脉内皮细胞 ,用丝状噬菌体 （FUSE5 ）表面展示的随机 6肽和 15肽文库进行混合筛选 ,通过DNA序列测定确定其插入的氨基酸序列。结果　经过 3轮筛选 ,得到一些特异性结合的噬菌体克隆 ,随机挑选 10个克隆 ,进行DNA序列分析 ,其中 8个克隆含 6肽序列 ,2个克隆含 15肽序列。结论　用噬菌体技术能筛到与受损内皮细胞亲和力高、结合力强的特异性短肽

语种： 中文