高表达醛糖还原酶相似基因的HepG2单克隆细胞模型的建立
作者:
郑春华;万腊香;曹德良;吴孟津;杨永宗;...
期刊:
中华肝脏病杂志 ,2002年10(6):465-466 ISSN:1007-3418
通讯作者:
Zheng, C.
作者机构:
410011,长沙,中南大学湘雅医院心导管室;南华大学分子生物学研究中心;美国耶鲁大学医学院;东南大学医学院;[金俊飞] 东南大学
关键词:
醛糖还原酶相似基因;肝癌;耐药;HepG2单克隆细胞;细胞模型
摘要:
醛糖还原酶相似基因(aldose reductase-like gene,ARL-1)表达的增高与肝癌抗药性关系的研究是近年来发展的一个新课题.
语种:
中文
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诱发糖尿病饲料致新西兰兔动脉粥样硬化时血糖、血胰岛素和肝、肾、胰组织结构的变化
作者:
王宗保;袁中华;余坚;姚峰;尹卫东
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,2001年9(5):391-393 ISSN:1007-3949
作者机构:
[王宗保; 余坚; 姚峰] 南华大学实验动物学部;[袁中华; 尹卫东] 南华大学心血管病研究所;南华大学心血管病研究所 湖南省衡阳市421001
关键词:
诱发糖尿病饲料;新西兰兔;糖尿病;动脉粥样硬化;病理学
摘要:
为探讨诱发糖尿病饲料致新西兰兔动脉粥样硬化时血糖、血胰岛素水平和肝、肾、胰组织结构的变化特点,将雄性新西兰兔随机分为2组:基础饲料(对照)组和高糖高脂饲料(实验)组,观察6个月.每月采空腹血测血糖和血清胰岛素浓度.实验结束时全部处死动物,取肝脏、肾脏和胰腺,用10%***液固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,并对肝脏切片作糖元染色,光学显微镜下观察.结果发现,实验组1月后出现高血糖,并随时间延长而逐渐升高.对照组血糖未见升高,两组比较差异显著(P<0.05).实验组血清胰岛素水平没有升高.实验组肝细胞有明显脂肪变性,细胞肿胀,胞浆内糖元基本消失;还有肾小球增大、细胞增多、毛细血管壁增厚、僵硬,肾小管上皮细胞体增大等病理改变;胰腺组织表现为胰岛萎缩,胰岛边缘皱缩,胰岛细胞数量减少,多数细胞呈梭形.此结果表明,高糖高脂饲料可诱发新西兰兔发生糖尿病和动脉粥样硬化病变.
语种:
中文
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血管内皮细胞生长因子促进培养的血管内皮细胞胶原Ⅱ型基因mRNA的表达(摘要)
作者:
曾海涛;罗迪贤;曾赛珍;刘革修;黄红林;...
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,2001年9(2):126 ISSN:1007-3949
作者机构:
[曾赛珍; 罗迪贤; 曾海涛] 临床医学专业1996级学生,
关键词:
血管内皮细胞生长因子;内皮细胞;基因表达
摘要:
1 材料和方法
1.1 内皮细胞培养
取新生儿脐带,收集内皮细胞。于37℃5%CO2培养箱内用含20%胎牛血清的M199培养基培养(含青霉素50 ku/L、链霉素100 mg/L、谷氨酸 2 mmol/L和GIBCO BRL)。采用形态及CD33免疫组织化学方法鉴定。
1.2 Northern blot分析
取第2~4代内皮细胞,以5.0×104个/cm2接种于1%胎牛血清的M199培养基中培养48 h后,给予血管内皮细胞生长因子(VEGF)培养24 h,采用异硫氰酸胍酸酚一步法提取总RNA。紫外分光光度计测定RNA浓度。胶原基因IODN探针设计为5’-GGAGCTCCTGGGCCTCAGCC-3’;GAPDH探针设计为5’-TGAAGGTCGGAGTCAACGGA-3’。取15 μg RNA作变性甲醛电泳,转印于硝酸纤维膜,以鱼精DNA做预杂交,采用T4 DNA核苷酸激酶同位素标记反义ODN探针做杂交。经Northern blot印迹杂交放射自显影后,采用光密度扫描仪扫描,得该标本VEGF mRNA水平(以GAPDH为内对照)。实验重复3次,每次每组设6孔。
语种:
中文
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栗柄金粉蕨的黄酮成分
作者:
郑兴;余麟;谢志忠;陈凯;王蓉蓉;...
期刊:
天然产物研究与开发 ,2000年12(5):42-45 ISSN:1001-6880
作者机构:
衡阳医学院药物学系;[许云龙] 中国科学院昆明植物研究所;[郑兴; 陈凯; 王蓉蓉; 余麟; 谢志忠] 衡阳医学院
关键词:
栗柄金粉蕨;黄酮
摘要:
从湖南省江华瑶族自治县产的栗柄金粉蕨 ( Onychium lucidum)的地上部分分离得到 4个黄酮化合物 ,经光谱鉴定为 :木犀草素 - 7-葡糖甙 ( 1) ,3,7-二甲氧基槲皮黄素( 2 ) ,槲皮黄素 - 3-葡糖甙 ( 3)和金粉蕨素 ( 4 ) ,均为首次从该植物中获得。
语种:
中文
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转基因小鼠中人清道夫受体AI基因的稳定遗传和特异表达
作者:
万腊香;杨永宗;曹德良;吴孟津;万载阳;...
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,2000年8(1):5-12 ISSN:1007-3949
作者机构:
[万腊香; 杨永宗; 吴孟津; 万载阳] 衡阳医学院分子生物学研究中心;[SookjaS.Chung; StephenS.M.Chung] 香港大学分子生物学研究所;[曹德良] Department of Pharmacology,Yale University School of Medicin;[陈修] 湖南医科大学药理学教研室
关键词:
人清道夫受体AI;小鼠;转基因;遗传;基因表达;内皮;血管;动脉粥样硬化
摘要:
为阐明人清道夫受体AI (hSR-AI)的功能及在动脉粥样硬化发生中的作用,本研究首先构建了含鼠 tie-1启动子和人清道夫受体AI cDNA的表达载体,经酶切及测序鉴定后,用显微注射的方法将制备好的tie-1-hSR-A-BGH poly A片段注入受精卵,将注射后存活的受精卵移入IC R假孕母鼠,产下的仔鼠经聚合酶链反应和Southern blot分析,筛选出整合有外源目的基因的阳性转基因鼠;对小鼠组织RNA行逆转录聚合酶链反应及组织切片免疫组织化学染色,检测人清道夫受体AI在小鼠体内的表达水平及表达部位;光镜及电镜观察转基因鼠血管及其它组织的病理变化.结果发现, 重组Tie-1/hSR-AI质粒中鼠tie-1启动子和人清道夫受体AI cDNA序列正确,显微注射后存活的 561枚受精卵分别移入19只ICR假孕母鼠,有13只受孕,共产下56只仔鼠,存活54只,经过整合检测 ,检出7只阳性鼠,整合效率为13%.在G1、 G2、 G3 代及纯合子转基因鼠中PCR阳性率分别为47.8%、 71.3%、 75.0% 和 100%.5只雄性转基因鼠的主动脉、肾、肝等组织中均有人清道夫受体 AI表达,且主要集中在血管的内皮细胞上;转基因鼠主动脉内皮细胞明显水肿,表面呈多囊状和虫蚀样改变,胞质中有较多水泡,中膜有糖原沉积样灶性病变,平滑肌细胞中亦有水肿 ;血浆甘油三酯水平明显高于非C57BL/6鼠(P<0.05),总胆固醇水平虽不比C57BL/6高,但雄性鼠总胆固醇水平明显高于雌性(P<0.01).这些结果提示,已成功建立了鼠tie-1启动子驱动人清道夫受体AI在血管内皮细胞特异性表达的转基因鼠.外源基因能在子代鼠中稳定遗传.转基因鼠血管出现内膜水样变性及中膜粘液样变性等动脉粥样硬化的早期病理改变,表明人清道夫受体AI转基因鼠可能易感动脉粥样硬化,成为新的动脉粥样硬化模型.
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利用复合PCR扩增荧光自动STR分型方法认定犯罪嫌疑人1例报告
作者:
江斌
期刊:
中山大学学报(医学科学版) ,2000年21(1):72-73 ISSN:1672-3554
作者机构:
[江斌] 衡阳医学院分子生物学研究中心
关键词:
荧光自动DNA检测;聚合酶链反应;性犯罪;个人识别方法
摘要:
某派出所送来蒋某(女)控告于1998年7月1日被嫌疑人张某(男)强奸的有关检材。送检样品:①避孕套一只:套内精液少量,呈红棕色、恶臭、腐败状;②受害者蒋某血纱一份;③嫌疑人张某血纱一份。送检目的:要求做DNA鉴定以确定避孕套内的精液是否为张某所留。本研究所利用复合P...
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中国广州汉族人群六个STR位点的调查
作者:
江斌;郭景元
期刊:
中华医学遗传学杂志 ,2000年17(1):42-46 ISSN:1003-9406
通讯作者:
Jiang, B.
作者机构:
[江斌] 衡阳医学院分子生物学研究所;[郭景元] 中山医科大学法医系物证学教研室
通讯机构:
[Jiang, B.] C;Center of Molecular Biology, Hengyang Medical College, China
关键词:
群体遗传学;短串联重复序列;聚合酶链式反应
摘要:
目的:了解广州汉族人在vWA31A等6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点法医学的有关数据.方法:运用STR-PCR、4%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,结合荧光DNA自动检测技术,对汉族人群6个STR位点的等位基因频率和基因型频率进行了调查,并与其他种族或人群的等位基因频率进行了比较.结果:6个STR位点是vWA31A、TH01、F13A01、FES、TPOX和CSF1PO,所有位点的结果均符合Hardy-Weinberg平衡,且各位点等位基因间无相关性,除vWA31A外,其它5个位点的杂合度均低于白种人和黑种人.6个位点的累积DP=0.99999,PE=0.9708,pM=1.059×10-5.结论:所得到的等位基因频率等数据可为中国汉族人群法医个人识别、亲子鉴定及遗传学研究提供依据.
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中文
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PQE-ARL-1重组表达质粒的构建及ARL-1蛋白的制备与纯化
作者:
郑春华;万腊香;吴孟津;曹德良;杨永宗
期刊:
中华肝脏病杂志 ,2000年8(6):364-366 ISSN:1007-3418
通讯作者:
Zheng, C.
作者机构:
[郑春华; 万腊香; 吴孟津; 杨永宗] 衡阳医学院分子生物学研究中心;[曹德良] 美国耶鲁大学附属医院
关键词:
基因组;人类;基因重组;基因表达;质粒
摘要:
目的 进一步了解人醛糖还原酶相似原因(aldose reductase like-1,ARL-1)的功能及其生物学活性,为制备特异性的ARL-1抗体作准备。方法 用基因重组技术构建PQE-ARE-1原核表达载体。在M15大肠杆菌中进行表达,然后利用Ni^+-NTA琼脂柱纯化ARL-1蛋白。结果 经酶切鉴定,PQE-30表达载体上已插入了ARL-1基因,PQE-ARE-1在大肠杆菌中表达产物人重组ARL-1蛋白经纯化后进行SDS-PAGE电泳。成一条蛋白带,分子量为37.7×10^3,表达产物约占全菌蛋白的25%,定量测得ARL-1蛋白的浓度为100mg/L。结论 PQE-ARE-1重组质粒的构建及ARL-1蛋白的制备,为深入研究ARL-1的功能及制备特异性的ARL-1抗体奠定了坚实的基础。
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mdm2在骨巨细胞瘤中表达的研究
作者:
田英;廖瑛;乔新惠;吴颜辉;周秀田;...
期刊:
中国肿瘤临床 ,2000年27(4):262-264 ISSN:1000-8179
作者机构:
[田英; 乔新惠; 吴颜辉; 宋岚] 衡阳医学院生化教研室;[廖瑛] 衡阳医学院附属第一医院;[周秀田] 衡阳医学院肿瘤研究所
关键词:
免疫组织化学;骨巨细胞瘤
摘要:
目的 :探讨mdm2癌基因蛋白在骨巨细胞瘤 (GCT)的表达及与GCT病理分级和临床良恶性的关系。方法 :应用SP免疫组织化学方法检测mdm2在 5 2例GCT(GCT按Jaffe分级 :Ⅰ级 15例、Ⅱ级 2 5例、Ⅲ级 12例 )中的表达。结果 :18例mdm2表达呈阳性 ,占 34 .6 % ,在Ⅰ~Ⅲ级中的阳性表达率分别为 40 .0 %、32 .0 %、33.3% ,mdm2阳性表达率在骨巨细胞瘤Ⅰ~Ⅲ级中的差异无显著性意义 (χ2 =0 .2 8,P >0 .0 5 )。在良性、可疑恶性和恶性中的阳性表达分别为 15 .0 %、35 .3%、6 0 .0 % ,mdm2阳性表达率在骨巨细胞瘤良恶性中的差异有显著性意义 (χ2 =7.6 7,P <0 .0 5 )。结论 :mdm2在GCT中的表达与病理分级无关而与其临床良恶性程度有关。
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中文
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CD36抗原与动脉粥样硬化
作者:
李全忠;杨永宗
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,1999年7(1):82-84 ISSN:1007-3949
作者机构:
衡阳医学院分子生物学研究中心
关键词:
CD36抗原;粘附分子;清道夫受体;动脉粥样硬化
摘要:
CD36抗原是一种细胞膜糖蛋白;它既是粘附分子,又是清道夫受体,参与包括动脉粥样硬化在内的许多生理和病理过程。本文介绍CD36抗原的生物学特性及其在动脉粥样硬化发生中的作用。
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中文
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蛋白磷酸化对胞核因子-kB活化的调节
作者:
欧和生;廖端芳;唐朝枢
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,1999年7(1):80-82 ISSN:1007-3949
作者机构:
北京医科大学第一医院心血管基础研究所;衡阳医学院药理学教研室
关键词:
蛋白磷酸化;胞核因子-kB;基因转录
摘要:
可逆性蛋白磷酸化由蛋白激酶和蛋白磷酸化酶共同参与调节,它是各种细胞活动过程中信号传递的重要机制之一;胞核因子-kB以非活性状态存在于胞浆中,它与抑制性蛋白结合成复合物;蛋白激酶对抑制性蛋白的磷酸化是胞核因子-kB活化的重要方式,许多因素通过影响蛋白磷酸化来调节胞核因子-kB的活化、核转位及其与DNA的结合,从而影响靶基因的转录调节。
语种:
中文
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急性白血病MTS1基因缺失及点突变的研究
作者:
李戈;符仁义;石伟;李兰;杨和平;...
期刊:
中华儿科杂志 ,1999年37(5):264-266 ISSN:0578-1310
作者机构:
[李戈; 石伟; 李兰; 杨以桡] 四川省人民医院;[符仁义] 华西医科大学附属第二医院;[杨和平] 衡阳医学院分子生物学研究中心
关键词:
白血病;基因.抑制.肿瘤;点突变;聚合酶链反应;基因缺失
摘要:
目的 探讨多肿瘤抑制基因(MTS1)突变与恶性血液病间的关系,方法 应用聚合酶链反应-单链查象多态性(PCR-SSCP)分别和DNA印迹(southermblot)方法检测35例急性白血病患儿MTS1基因的改变。结果 急性淋巴细胞白血病(AL)患儿的MTS1基因缺失(包括点突变)为26%(8/31),其中纯合子缺失,B-ALL为16%(4/25),T-ALL为6例中有2例,点突变则两型各占1例。结
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中文
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胰岛素抵抗高血压大鼠血管舒张功能异常的机制
作者:
陈颜芳;杨和平;韩启德
期刊:
中华高血压杂志 ,1999年7(2): 183 ISSN:1673-7245
作者机构:
广东省心血管病所;衡阳医学院分子生物学中心;北京医科大学附属第三医院
关键词:
胰岛素抵抗;高血压;血管舒张;Ca ̄(2+)-ATP酶
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中文
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碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸抑制胰岛素诱导动脉平滑肌细胞增殖
作者:
欧大明;刘革修;刘江华;唐振旺;陈临溪;...
期刊:
中国动脉硬化杂志 ,1999年7(2):99-102 ISSN:1007-3949
作者机构:
[欧大明; 刘江华; 唐振旺] 衡阳医学院附属第一医院;[刘革修; 陈临溪; 黄红林; 廖端芳] 衡阳医学院药理学教研室
关键词:
成纤维细胞生长因子.碱性;寡核苷酸.反义;肌.平滑.血管;细胞培养;胸腺嘧啶;胰岛素;基因表达;大鼠
摘要:
为研究胰岛素诱导的动脉平滑肌细胞增殖作用和碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷对培养的Wistar大鼠主动脉平滑肌细胞生长的影响。采用胰岛素和碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸处理培养的Wistar大鼠主动脉平滑肌细胞,Northenblot检测碱性成纤维细胞生长因子基因mRNA表达,并测定氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入和细胞计数。结果发现胰岛素能明显诱导平滑肌细胞碱性成纤维细胞生长因子mRNA表
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中文
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银杏叶提取物保护血管内皮细胞免受溶血磷酯酰胆碱损伤
作者:
Chen, JX;Chen, WZ* ;Huang, HL;Chen, LX;Xie, ZZ;...
期刊:
中国药理学报 ,1998年19(4):359-363 ISSN:1671-4083
通讯作者:
Chen, WZ
作者机构:
[Chen, WZ] Chinese Acad Sci, Shanghai Inst Mat Med, Shanghai 200031, Peoples R China.;Hengyang Med Coll, Dept Pharmacol, Hengyang 421001, Peoples R China.
通讯机构:
[Chen, WZ] C;Chinese Acad Sci, Shanghai Inst Mat Med, Shanghai 200031, Peoples R China.
关键词:
Eposprostenol;Flavones;Ginggolides;Ginkgo biloba;Lysophosphatidylcholines;Malondialdehyde;Thoracic aorta;Vascular endothelium;Vitamin E
摘要:
AIM: To study the protective effects of Ginkgo biloba extract (GbE) against endothelial cell damage induced by lysophosphatidylcholine (LPC). METHODS: The vasorelaxation response to acetylcholine (ACh) were investigated in the isolated rabbit thoracic aorta. Lipid peroxidation products were determined by measuring thiobarbituric acid reactive substance. RESULTS: GbE attenuated the inhibition of vasorelaxation response to ACh and prevented the LPC-induced increase of malondialdehyde (MDA) content both in thoracic aortae. GbE prevented the leakage of LDH and the increase of MDA content in cultured endothelial cells in a concentration-dependent manner. GbE also markedly increased epoprostenol level in cultured endothelial cells treated with LPC. CONCLUSION: GbE protected endothelial cells against LPC-induced damage due to reduction in lipid peroxidation and facilitation of synthesis and/or release of eposprostenol.
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酵母菌多糖对肉鸡增重的影响
作者:
高天舒;廖迎春;高仕瑛
期刊:
中国兽医杂志 ,1998年24(9):15 ISSN:0529-6005
作者机构:
[高天舒; 廖迎春; 高仕瑛] 衡阳医学院实验动物部
关键词:
酵母菌多糖;肉鸡;增重;促进作用
摘要:
由啤酒酵母菌制备的酵母多糖(YeastPolysaccharideYPS)无毒、无诱变性并具有系列生物学活性[1~4],是一种新型的微生态调节剂。YPS资源丰富,制取技术简易。为其在养禽业或畜牧业中应用提供科学证据,我们开展了系列实验,现将YPS对肉...
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中文
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L-精氨酸对猪冠状动脉内皮功能的影响
作者:
焦鸿丽;刘易林;万腊香;杨和平;杨永宗
期刊:
基础医学与临床 ,1997年17(4):53-56 ISSN:1001-6325
作者机构:
[焦鸿丽; 万腊香; 杨和平; 杨永宗] 衡阳医学院分子生物学研究中心;[刘易林] 广东韶关市粤北人民医院
关键词:
L-精氨酸;冠状动脉;氧化低密度脂质蛋白;内皮领事性舒张
摘要:
以氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导猪冠状动脉内皮功能障碍,观察L-精氨酸(L-arg)对正常及内皮功能障碍的冠脉的影响。结果显示ox-LDL可使猪冠脉舒张功能下降而L-arg可部分阻止这一作用。用逆转录PCR技术检测了冠脉血管灌流后结构型一氧化氮合成酶(cNOS)mRNA表达,结果表明ox-LDL可抑制血管cNOS mRNA表达而L-arg可拮抗这一抑制作用。
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动脉硬化平滑肌细胞增殖和凋亡及其调节
作者:
杨和平;杨永宗
期刊:
高技术通讯 ,1997年7(8):49-52 ISSN:1002-0470
作者机构:
[杨和平; 杨永宗] Hengyang Medical Coll, China
关键词:
动脉粥样硬化;平滑肌细胞;细胞增殖;细胞凋亡;调节
摘要:
为阐明动脉粥样硬化(AS)斑块发展与稳定的内在机制,围绕动脉增生内膜、AS斑块内平滑肌细胞(SMC)增殖和凋亡密切相关的即刻早期基因(c-fos、c-jun、c-myc)和相关基因(p53、bc1-2、c-sis)表达失衡和重调这一中心展开研究,提出血管SMC增殖和凋亡是决定AS斑块发展的关键环节。
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病毒感染与动脉粥样硬化
作者:
万腊香;杨和平;杨永宗
期刊:
生理科学进展 ,1996年27(3):277-279 ISSN:0559-7765
通讯作者:
Wan, L.X.
作者机构:
[万腊香; 杨和平; 杨永宗] 衡阳医学院分子生物学研究中心
关键词:
病毒感染;动脉粥样硬化;细胞转化
摘要:
毒感染能活化凝血系统和内皮上的单核细胞受体,从而增强单核细胞的粘附;还可能改变细胞脂质代谢,促使血液凝固和细胞转化。与动脉粥样硬化发生发展有密切关系。
语种:
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