目的 ：本研究模拟脑缺血-再灌注损伤,复制海马神经元(HT22细胞)缺氧-复氧损伤模型以观察缺氧-复氧对海马神经元自噬的影响,探讨自噬变化在海马神经元缺氧-复氧损伤过程中的可能作用.方法：1.根据文献自制密闭缺氧装置,待HT22海马神经元融合度达80％后,放入缺氧装置内,通入95％N2+5％CO2混合气体造成细胞缺氧.实验分三组,以相应时间的正常培养为对照,分别观察缺氧1h、3h和6h对HT22细胞自噬和功能的影响.检测指标包括,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-l、LC3Ⅱ/Ⅰ比值的变化以及P62的表达水平,MTT比色法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒比色法检测HT22细胞的功能.
