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pcDNA3.1/SjDLC和pcDNA3.1/mIFN-γ重组质粒构建及表达

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成果类型:
期刊论文
作者:
高勇强;阳青兰;胡丽;梁瑜;刘彦;...
作者机构:
南华大学医学院病原生物学研究所 湖南 衡阳421001
南华大学护理学院内护教研室
南华大学医学院寄生虫学教研室
[高勇强; 阳青兰; 王可耕; 刘彦; 胡丽; 肖建华; 张愉快; 梁瑜] 南华大学
语种:
中文
关键词:
DNA疫苗;动力蛋白轻链;干扰素-γ
关键词(英文):
DNA vaccine;SjDLC;IFN-γ
期刊:
中南医学科学杂志
ISSN:
2095-1116
年:
2017
卷:
45
期:
6
页码:
558-561+579
基金类别:
13C824:湖南省教育厅科学研究项目 CX2015B415:湖南省研究生科研创新项目 No.2015-351:湖南省分子靶标新药研究协同创新中心资助项目 NO.2014-5:特殊病原体防控湖南省重点实验室项目
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
医学院
护理学院
摘要:
目的 构建日本血吸虫动力蛋白轻链DNA疫苗和小鼠干扰素真核表达质粒,研究其在He La细胞及动物体内的表达。方法 设计特异性引物,PCR扩增获取动力蛋白轻链(Sj DLC)与干扰素-γ(IFN-γ)基因,克隆于pc DNA3.1真核质粒,经双酶切及测序鉴定。将两种重组质粒分别转染至He La细胞,Western blot鉴定其表达。真核质粒经左腿股四头肌免疫小鼠,在末次免疫2周后,PCR法检测小鼠肌组织内Sj DLC和IFN-γ基因,免疫组织化学法检测基因的表达,MTT法检测T细胞增殖水平。结果 PCR和双酶切能检测到280 bp的Sj DLC基因及480 bp的IFN-γ基因;Western blot显示在12 k Da和19 k Da处有阳性反应条带,与Sj DLC和IFN-γ分...
摘要(英文):
Objective To construct the dynein light chain of Schistosoma japonicum DNA vaccine and IFN-γ recombi- nant plasmid of mice,so as to investigate their expression in HeLa cells and mouse. Methods A pair of primers designed by PRIMER5.0 software was synthesized;the gene fragments of SjDLC and mIFN-γ/were amplified by PCR, and inserted into eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1, where the recombinant plasmids were identified with restrictive enzymes and sequenced.The recombinant vectors pcDNA3.1/SjDLC and pcDNA3.1/mIFN-γ/were transfected into H...

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