目的:应用RNA干扰技术,构建针对3T3-L1脂肪细胞A-FABP的Micro RNA表达载体,研究干扰A-FABP基因的表达对脂肪细胞合成甘油三酯及脂联素分泌的影响。 方法:构建靶向A-FABP基因的microRNA表达载体,将上述载体转染3T3-L1脂肪细胞后,用RT-PCR及Western Blot检测A-FABP mRNA及蛋白的表达。将诱导成熟的3T3-L1脂肪细胞与0~1mmol/ L的游离脂肪酸(FFA)共孵育24h,用ELISA法测定其甘油三酯及脂联素浓度。建立 A-FABP基因沉默细胞模型,选取0.5mmol/L的游离脂肪酸(FFA)与成熟脂肪细胞共孵育24h,实验分四组:①对照组②对照组+0.5mmol/LFFA③RNAi组④RNAi组+0.5mmol/LFFA;用ELISA法分别测定其甘油三酯及脂联...
