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应用噬菌体展示肽库筛选生殖支原体黏附蛋白的模拟表位

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成果类型:
期刊论文
作者:
曾焱华;游晓星;何军;刘良专;唐正宇;...
通讯作者:
Wu, Y.-M.
作者机构:
[曾焱华; 游晓星; 刘良专; 余敏君; 吴移谋] 南华大学病原生物学研究所
[何军] 南华大学附属南华医院
[唐正宇] 长沙卫生职业学院
通讯机构:
[Wu, Y.-M.] I
Institute of Pathogenic Biology, University of South China, China
语种:
中文
关键词:
生殖支原体;黏附蛋白;噬菌体展示肽库;模拟表位
关键词(英文):
Adhesin protein;Mimic epitope;Mycoplasma genitalium;Phage display random peptide library
期刊:
中华微生物学和免疫学杂志
ISSN:
0254-5101
年:
2012
卷:
32
期:
1
页码:
84-90
基金类别:
国家自然科学基金项目(30801064) 湖南省研究生科研创新项目(CX20108381) 湖南省高校科技创新团队(湘教通2010-212号)
机构署名:
本校为第一且通讯机构
院系归属:
医学院
摘要:
目的利用纯化的兔抗重组生殖支原体黏附素蛋白(rMgPa)的多克隆抗体(pAb)从噬菌体展示随机12肽库筛选MgPa的模拟表位。方法用纯化的兔抗rMgPa的pAb对噬菌体随机12肽库进行生物淘洗,随机挑取噬菌体克隆进行DNA测序与分析,并用MIMOX对噬菌体克隆所展示的肽序列进行生物信息学分析。用ELISA、竞争性结合试验和Western blot检测噬菌体与pAb结合的特异性。结果4轮生物淘洗后特异性噬菌体克隆得到了明显的富集。依据氨基酸组成的不同,74个噬菌体克隆所展示的肽序列可大致分为3组。经对肽序列进行比较分析以及用MIMOX进行生物信息学分析,结果表明这3组的核心序列分别为:P-S-A-A/V-X-R-F/W-E/S-L-S-P、A-...
摘要(英文):
Objective: To screen a 12-mer phage display peptide library by the polyclonal antibod-y (pAb) against the recombinant adhesion protein of Mycoplasma genitalium (rMgPa) in order to obtain the antigenic mimic epitopes of MgPa. Methods: The purified pAb was used to screen the immunodominant mimic epitopes of MgPa by a random 12-peptide phage display library. Seventy-four recombinant phage clones were randomly selected, and then DNA sequence analysis and computer-based bioinformatics analysis were performed to define the consensus amino acid residues of the mimotopes by MIMOX. The binding specific...

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