目的:1.构建表达pokemon基因的慢病毒载体,建立稳定性表达pokemon基因的乳腺癌MCF-7细胞系,并分别观察pokemon的高表达对MCF-7细胞侵袭和迁移能力的影响。2.探讨乳腺癌组织中pokemon蛋白的表达及意义。 方法:实验分为两部分:第一部分通过RT-PCT方法获得pokemon-cDNA,将pokemon-cDNA与GV-165载体连接,得到带有目的基因慢病毒表达载体,再将三种质粒(GV165/Pokemon、pHelper1.0、pHelper2.0)共转染293T细胞,包装得到病毒载体原液并测定其滴度。将得到的高滴度pokemon表达病毒载体(pokemon组)和空白病毒载体(NC组)分别转染MCF-7细胞,建立稳定高表达pokemon的乳腺癌MCF-7细胞系。...