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一种高效准确定量计数噬菌体肽库目标分子的方法

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成果类型:
期刊论文
作者:
王可耕;曾庆仁;禹正杨;曾铁兵;刘彦
通讯作者:
Wang, K.G.
作者机构:
[王可耕; 刘彦] 南华大学医学院寄生虫学教研室
[曾庆仁] 中南大学医学细胞与分子生物学实验中心
[禹正杨] 南华大学附属第一医院肿瘤外科
[曾铁兵] 南华大学医学院微生物学和免疫学教研室
语种:
中文
关键词:
噬菌体;效价;双层琼脂平板法;荧光实时定量PCR
关键词(英文):
Titer;Double layer agar plate method:Real-Time PCR
期刊:
中国寄生虫学与寄生虫病杂志
ISSN:
1000-7423
年:
2011
卷:
29
期:
3
页码:
236-238
基金类别:
国家自然科学基金(No.30570952) 湖南省卫生厅项目(2009) 湖南省科技项目(2010)
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
医学院
摘要:
利用双层琼脂平板法与荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术分别测定少量、中量和大量噬菌体的效价。结果显示,双层琼脂平板法与Real-time PCR法均可准确测定噬菌体效价。双层琼脂平板法所得符合条件的平板约为总数的1/3,需重复测定10次,每次消耗噬菌体10μl,测得噬菌体效价的组内变异系数为4.93%~30.38%。Real-timePCR法重复测定3次即可,每次消耗噬菌体1μl,其组内变异系数仅为0.02%~0.25%,明显低于双层琼脂平板法。提示,Real-time PCR技术可简单、迅速地测定噬菌体效价。
摘要(英文):
The phage titer of samples representing the low, intermediate and high phage number was respectively determined by the double-layer agar plate (DLAP) method and real-time PCR assay. The two methods accurately measured the titer of samples. The plaques from about 1/3 double-agar layer plates could be used to determine the phage titer. The DLAP experiment should repeat 10 times with 10 microl sample each time, while the within-assay coefficient variation (CV) was 4.93%-30.38%. At the same time, the real-time PCR assay only repeated 3 times with 1 microl phage each time, while CV for within-assay...

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