期刊论文

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中华检验医学杂志

1009-9158

2005

28

7

697-699

10.3760/j:issn:1009-9158.2005.07.008

湖南省科技厅重点课题资助项目（04SK2003）； 湖南省卫生厅资助项目（B2003078）；

本校为第一机构

目的 表达沙眼衣原体外膜蛋白2,纯化表达产物,并对其免疫性进行鉴定.方法应用聚合酶链反应(PCR)技术获得沙眼衣原体D型外膜蛋白2第167～434位氨基酸的编码基因片段,将此片段克隆于表达载体pET28b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE、蛋白印迹试验分析表达产物,亲和层析法纯化重组蛋白;重组蛋白免疫家兔以检测其免疫原性.结果重组质粒酶切分析及DNA测序证实成功构建pET28b(+)/Omp2aa167～aa434表达质粒;通过优化表达和纯化条件,获得了相对分子质量约为35.0×103纯化蛋白产物,蛋白印迹试验证实该重组蛋白能与Ct 感染者阳性血清反应;ELISA法测定免疫血清特异性抗体效价在1:1 280以...

Objective To express outer membrane protein 2 （Omp^2） of Chlamydia trachomatis, purify expressed products and study its immunity. Methods The target gene encoding Omp^2 167-434 amino acid residues was amplified by PCR from C, trachomatis template DNA, The targeted DNA fragment was cloned into expression vector pET28b（＋） and introduced into competent E, coli BL21 （DE3） cell, Recombinant Omp^2aa167 -aa434 was expressed after induction by IPTG and analyzed by SDS-PAGE and Western blot, purified with Ni-NTA-His affinity chromatography, The r...