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SARS病毒s1基因片段真核表达载体的构建及免疫效果

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成果类型:
期刊论文
作者:
蔡恒玲;吴移谋;万艳平;肖建华;杨秋林;...
作者机构:
南华大学病原微生物学教研室,湖南,衡阳,421001
南华大学寄生虫教研室,湖南,衡阳,421001
语种:
中文
关键词:
SARS相关冠状病毒;S1基因;免疫活性;真核表达
关键词(英文):
S1 gene;Immunological activity;Eukariotic expression
期刊:
中国病毒学:英文版
ISSN:
1674-0769
年:
2005
卷:
20
期:
5
页码:
464-467
基金类别:
湖南省教育厅非典科技攻关项目(0309)
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
医学院
摘要:
本研究根据GenBank登录的BJ01株SARS-CoV序列合成801bpS1基因片段,该片段被亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)得到重组质粒pcDNA3.1(+)/S1;转染Hela细胞,SDS-PAGE、Western-Blotting鉴定蛋白表达;肌注免疫BALB/c小鼠,利用ELISA法检测免疫后小鼠的抗SARS/CoVIgG及IFN-γ水平,MTT法检测T细胞增殖活性.结果显示,重组质粒pcDNA3.1(+)/S1可在Hela细胞内表达S1蛋白,免疫后小鼠的T细胞增殖活性增强,抗SARS-CoVIgG与IFN-γ水平升高.本实验说明pcDNA3.1(+)/S1可诱导小鼠产生一定的体液免疫和细胞免疫应答.
摘要(英文):
The 801 base pairs of S1 gene fragment were synthesized based on the Sever acute respiratory syndrome associated coronavirus(SARS-CoV)BJ01 strain registered in GenBank. The synthetical DNA was subcloned into the appropriate site of pcDNA3.1 (+) eukariotic expression vector to construct a recombinant plasmid pcDNA3.1(+)/S1;The recombinant plasmid pcDNA3.1(+)/S1 was transfected into Hela cells and the expressed protein was identified By SDS-PAGE and Western-blotting;BALB/c mice were immunized with pcDNA3.1(+)/S1 by i. m. The level o...

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