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一种生物样品中多巴胺的快速检测方法

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成果类型:
专利
发明/设计人:
刘士蒙;吕昌银
申请/专利权人:
南华大学
专利类型:
发明专利
语种:
中文
申请时间:
2019-12-24
申请/专利号:
CN201911347518.1
公开时间:
2020-02-21
公开号:
CN110823884A
主申请人地址:
421009 湖南省衡阳市蒸湘区常胜西路28号
申请地区:
湖南
机构署名:
本校为第一完成单位
主权项:
1.一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,其特征在于,包括如下步骤:依次加入NaAc-HAc缓冲液80μL、Bromelain-MnO2溶液15μL、TMB溶液30μL以及待测样品,充分混匀,于37℃恒温反应20min,进一步的用UV-2550紫外-可见分光光度计比色测定,记录体系的A652值,根据线性回归方程计算样品中多巴胺的浓度。 2.根据权利要求1所述的一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,其特征在于,所述NaAc-HAc缓冲液的酸碱度为:pH=4.75、浓度为:100mmol/L;所述Bromelain-MnO2溶液浓度为5μmol/L;所述TMB溶液浓度为5mmol/L。 3.根据权利要求1所述的一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,其特征在于,所述Bromelain-MnO2溶液的合成方法为:在剧烈搅拌中,先加入320μL的MnCl2溶液,再加入600μL的菠萝蛋白酶溶液,然后将140μLNaOH溶液加入体系中,调节溶液至pH9.0,溶液逐渐变为浅棕色,最后加超纯水定容至1.50mL,室温下剧烈搅拌50分钟后,得到Bromelain-MnO2纳米片溶液,进一步的经过4000rpm离心10min,超纯水洗涤3次去除反应残留物,获得均匀分散的Bromelain-MnO2纳米片,将Bromelain-MnO2纳米片与水混合获得Bromelain-MnO2溶液,根据朗伯比尔A=Kbc计算制备的Bromelain-MnO2纳米片溶液浓度。 4.根据权利要求3所述的一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,其特征在于,根据朗伯比尔A=Kbc计算制备的Bromelain-MnO2溶液的浓度。 5.根据权利要求3所述的一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,其特征在于,所述MnCl2溶液的浓度为5mM;所述菠萝蛋白酶溶液的浓度为2mg/mL;所述NaOH溶液的浓度为0.1mM。
摘要:
本发明公开了一种生物样品中多巴胺的快速检测方法,包括如下步骤:依次加入NaAc‑HAc缓冲液80μL、Bromelain‑MnO2溶液15μL、TMB溶液30μL以及待测样品,充分混匀,于37℃恒温反应20min,进一步的用UV‑2550紫外‑可见分光光度计比色测定,记录体系的A652值,根据线性回归方程计算样品中多巴胺的浓度。本发明操作简便、检测快速、准确性高、稳定性好、线性范围更宽、成本非常低的优点,有利于在临床检验和医学科研上的推广应用。

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