专利

发明专利

中文

2018-04-04

CN201810298998.6

2018-11-06

CN108753772A

421001 湖南省衡阳市蒸湘区常胜西路28号

湖南

本校为第一完成单位

1.人CAPNS1基因CDS区第4外显子和/或第5外显子在构建CAPNS1基因敲除的人神经母细胞瘤细胞中的应用。

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及基于CRISPR/Cas技术敲除CAPNS1基因的人神经母细胞瘤细胞系的构建方法。本发明提供了敲除人神经母细胞瘤细胞CAPNS1基因的方法，质粒转染SK‑N‑SH细胞后，制备单克隆，CruiserTM Enzyme酶切后疑似为阳性克隆，单克隆测序结果显示SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功；并且，在CAPNS1‑/‑组，CAPNS1蛋白及Calpain1和Calpain2蛋白水平明显降低。结果表明SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功。