目的:构建幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI的真核表达载体pcDNA3.1(+)/ureI,并在HeLa细胞中进行表达。通过肌肉注射免疫C57BL/6小鼠,观察其所产生的体液免疫和细胞免疫应答水平,为研制高效、新型的幽门螺杆菌核酸疫苗提供实验依据。 方法:用PRIMER5.0软件设计引物, PCR扩增ureI基因,将该基因酶切插入pcDNA3.1(+)真核细胞表达载体构建 pcDNA3.1(+)/ureI重组载体,并转染HeLa细胞,用Western-blot观察鉴定其在真核细胞得到表达后,将核酸疫苗pcDNA3.1(+)/ureI、对照空质粒pcDNA3.1(+)及PBS分组通过肌肉注射免疫6w龄C57BL/6小鼠,隔周免疫一次,共免疫四次。 ELISA间接法测定小鼠血清中特异性...