目的:构建重组小鼠锌α2糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein )真核表达载体,并稳定转染3T3-L1细胞,观察3T3-L1细胞过表达ZAG后对线粒体生物合成相关因子的影响。方法:提取正常小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-RCR方法扩增出ZAG序列,克隆入经XbaⅠ和HindШ双酶切后的pcDNA3.1(-),重组小鼠ZAG真核表达质粒(pcDNA3.1(-)-mZAG)经转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,酶切和核苷酸测序鉴定后经脂质体转染3T3-L1细胞,G418筛选阳性克隆扩增,RT-PCR法鉴定ZAG阳性细胞株并检测过氧化物酶增殖型受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子1/2(NRF-1/2)、线粒体转录因子A(mtTFA)mRNA表达,Western Blot检测PGC-1α、NRF1/2...
