目的:研究GPR4(G protein-coupled receptor 4,GPR4)配体溶血卵磷脂(lysophosphatidylcholine,LPC)及鞘氨醇磷脂酰胆碱(sphingosylphosphorylcholine,SPC)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的生长效应及有关信号通路。
方法:采用脂质体2000将装有GPR4受体基因的pEFneo真核表达载体转染HUVEC,并通过G418(800μg/ml)筛选获得GPR4基因稳定表达细胞株;RT-PCR法鉴定稳定转染并检测转染前后GPR4受体mRNA的表达情况;MTT法检测细胞的生长活力;AO染色法观察LPC及SPC对HUVEC细胞造成的形态改变; Western blot法检测LPC及SPC与其受体相互作用后对c...