专利

发明专利

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2017-4-6

CN201710219103.0

2017-9-5

CN107129982A

421001 湖南省衡阳市常胜西路28号南华大学环境保护与安全工程学院环境工程系108室

湖南

牟海峰

济南诚智商标专利事务所有限公司 37105

本校为第一完成单位

一种聚磷菌印迹生物炭的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取5‑10g锯末，在200‑700℃温度下进行厌氧恒温热解4h；完全炭化后冷却至室温取出，得生物炭，将生物炭混匀研磨，过100目筛，于干燥器中保存备用；(2)取10g活性污泥加入90ml无菌水中混匀，室温静置10min，取上清液倍比稀释，不同梯度倍比稀释液分别利用倒平板培养方法培养，在出现明显单菌落的梯度平板中，分离纯化至平板上的单菌落形态一致，得初纯菌株，接于LB固体培养基斜面上，4℃保存备用；(3)取一部分初纯菌株接入驯化培养基三角瓶中，以温度为30℃、转速为150r/min条件下进行恒温好氧培养24h；取另一部分初纯菌株接入另一驯化培养基三角瓶中，将瓶中充入氮气进行厌氧培养24h；分别对好氧培养中菌体积累的聚磷颗粒和厌氧培养条件下菌体内积累PHB颗粒进行染色，选取在两种染色方法中都呈阳性的菌体为初筛菌；(4)将初筛菌株接入聚磷培养液中，在30℃、转速为150r/min摇床振荡培养12h，然后在10000r/min转速下‑30℃冷冻离心10min，取上清液稀释，用钼锑抗分光光度法，在700nm处测量其吸光度，计算磷的去除率，取菌体聚磷率大于60％的菌株为复筛菌；(5)步骤1)中得到的磷基生物炭和复筛菌按照质量比20:1的比例，分别加入固定化培养基中，在温度30℃、160r/min的恒温摇床中震荡培养18h，然后用30目的筛子过滤出吸附好菌体的磷基生物炭，即聚磷菌印迹生物炭。

本发明一种聚磷菌印迹生物炭的制备方法及应用,本发明提供的负载聚磷菌的生物炭可以为微生物提供了一个良好的生存环境,而且还可以帮助聚磷菌提高抵御高盐度和重金属的能力,同时吸附位点增多,且具有相当的稳定性,对重金属的吸附性能大大提高,产品无毒,对环境友好,本发明提供的制备方法简易,易于工业化生产。