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梅毒螺旋体Tp0821基因的克隆、表达、纯化及免疫活性研究

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成果类型:
期刊论文
作者:
伍宁;肖勇健;顾伟鸣;刘双全;赵飞骏;...
作者机构:
[伍宁; 赵飞骏; 张跃军; 吴移谋] 南华大学病原生物学研究所
[顾伟鸣] 上海皮肤病性病医院
[刘双全] 南华大学附属第一医院检验科
[肖勇健] 南华大学附属第二医院检验科
语种:
中文
关键词:
密螺旋体,苍白;重组蛋白质类;免疫活性;梅毒
关键词(英文):
Recombinant proteins;Immunocompetence;Syphilis
期刊:
中华皮肤科杂志
ISSN:
0412-4030
年:
2010
卷:
43
期:
7
页码:
489-492
基金类别:
湖南省教育厅重点资助项目(06A061) 湖南省自然科学基金课题(07JJ3028)
机构署名:
本校为第一机构
摘要:
目的 构建梅毒螺旋体(Tp)膜脂蛋白Tp0821的重组质粒,表达、纯化其相应蛋白,研究其免疫活性.方法 构建重组质粒pQE32/Tp082l,诱导表达其相应蛋白,以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体并测定其效价.建立间接ELISA法,检测80份梅毒参比血清、临床经FTA-ABS确诊的阳性血清各150份.结果 成功构建重组质粒pQE32/Tp0821,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白分子量与预期结果相符.将亲和层析后所获高纯度重组蛋白免疫新西兰兔,制备的多克隆抗体效价达1:6400.间接ELISA法检测梅毒参比血清、临床梅毒患者血清,与间接免疫荧光螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)法比较,其灵敏...
摘要(英文):
Objective To construct a recombinant plasmid encoding Tp0821,a membrane lipoprotein of T. pallidum,express and purify this protein,and to evaluate its immunocompetence.Methods The recombinant plasmid pQE32/Tp0821 was constructed and induced to express the corresponding protein.Then,New Zealand rabbits were immunized with purified recombinant protein to prepare polycional antibodies,and the titer of polyclonal antibody was determinated.Indirect ELISA was developed with the recombinant protein of T. pallidum as coating antigen to detect 80 control sera and 150 FTA-ABS-positive sera.Results The r...

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