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用于酵母双杂交的HL-60细胞dscDNA文库的构建

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成果类型:
期刊论文
作者:
李剑敏;张蒙夏;汪煜华;雷小勇;唐圣松
作者机构:
[李剑敏] 湖南中医药高等专科学校
[张蒙夏; 汪煜华; 雷小勇] 南华大学
[唐圣松] 湖南文理学院
语种:
中文
关键词:
HL-60细胞;酵母双杂交
关键词(英文):
M-CSF;ds cDNA
期刊:
医学分子生物学杂志
ISSN:
1672-8009
年:
2012
卷:
9
期:
2
页码:
84-87
基金类别:
国家自然科学基金(No.30270684),湖南省自然科学基金重点项目(No.09JJ3060),湖南省教育厅科技计划重点项目(No.10A087),湖南高校科技创新平台基金(No.09K072)
机构署名:
本校为其他机构
院系归属:
药学与生物科学学院
摘要:
目的构建用于酵母双杂交的HL-60细胞dseDNA文库.方法采用CLONTECH公司提供的SMART技术,提取对数生长期HL-60细胞的总RNA,逆转录生成第一链eDNA,LDPCR合成dseDNA,与pGAOT7-Rec共转化酵母菌AH109.结果成功构建了用于酵母双杂交的HL-60细胞dscDNA文库,AD转化效率为8×10~4efu/3μgpGADT7-Rec.结论HL-60细胞dscDNA文库可以充当酵母双杂交系统中的cD-NA文库,用于进一步筛选与M-CSF相互作用的非受体靶分子.
摘要(英文):
Objective To construct ds cDNA of HL-60 cells in yeast two-hybrid sys- tem. Methods With the SMART technology supplied by CLONTECH Company, the total RNA of HL-60 ceils was extracted and reversed to form the first cDNA, and ds cDNA was then synthesized through LD PCR. The ds cDNA was co-transformed with pGADT7-Rec into AH109 strain. Results The ds cDNA of HL-60 cells was successfully constructed in yeast two-hybrid system. AD co-transfor- mation efficacy reached up to 8×10^4 cfu/3μg pGADT7-Rec. Conclusion The ds cDNA of HL-60 cells can act as...

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