目的 探讨心脏高表达基因hhole调控心肌肥厚信号分子ANF的转录活性的分子机制.方法 利用生物信息学在线软件分析hhole蛋白的分子结构.利用酶切法和环状诱变技术突变得到hhole基因的突变体重组质粒.将突变体和野生型的重组质粒分别转染HEK293细胞系,测定荧光素酶报告基因ANF的转录活性.结果 生物信息学分析发现hhole蛋白含有ERK结合位点和多聚脯氨酸序列.利用酶切法构建了4个截短突变体重组质粒,环状质粒定点诱变的方法构建了3个定点突变的突变体.荧光报告系统分析发现pCMV-tag2B-TD与pCMV-tag2B-hhole全长均能强烈地抑制ANF的转录活性.结论 hhole蛋白主要通过其ERK结合位点抑制心肌肥厚信号分子...
