目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E2,将其与IL-12真核表达载体pcDNA3.1(+)/IL-12联合免疫BALB/c小鼠,检测小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,为HPV16诱发的宫颈癌治疗性核酸疫苗的研制奠定实验基础。 方法: (1)用PRIMER5.0软件设计HPV16 E2基因引物,PCR扩增HPV16 E2基因,经EcoR I、Xho I或Not I双酶切后连至载体 pcDNA3.1(+)或pGEX-6P-1,构建真核细胞表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E2和原核表达载体pGEX-6P-1/HPV16 E2,并进行序列分析。 (2)将质粒pcDNA3.1(+)/HPV16 E2转染HeLa细胞,利用RT-PCR或Western-blot检测HPV16 E2 mRNA...