作者： 唐国华;龙治峰;贺修胜;唐朝克;何淑雅;...

期刊： 中南医学科学杂志,2004年32(2):226-229 ISSN：2095-1116

作者机构： [何淑雅; 唐新民; 贺修胜; 龙治峰; 唐国华; 唐朝克] 南华大学

关键词： 流式细胞仪;石蜡切片

摘要： 目的探讨石蜡包埋组织制备单细胞悬液过程中,切片厚度对流式细胞仪检测结果的影响.方法以小型猪的肠系膜淋巴结为实验对象,将淋巴结分别制成新鲜组织单细胞悬液和石蜡组织块;石蜡组织块切割成不同厚度的薄片,再制成单细胞悬液;流式细胞仪分别检测其DNA含量;采用MultiCycle for Windows 分析软件分析它们之间的差异.结果新鲜组织的G0/G1期、S期、G2/M期细胞所占比例、G0/G1峰的CV值及Debris值与石蜡组织之间存在差异;而不同厚度石蜡切片组织间制备的样本所测结果亦不相同.结论不同厚度石蜡切片组织制备的细胞悬液,对流式细胞仪检测细胞周期分析的结果有影响;以采用60 μm厚的切片组织制备细胞悬液为最佳.

语种： 中文

作者： 唐朝克;孙文清;冯大明;易光辉;杨峻浩;...

作者机构： [唐朝克; 孙文清; 冯大明; 易光辉; 杨峻浩; 刘录山; 王佐; 王双; 万载阳; 杨保堂; 杨永宗] 南华大学心血管病研究所

会议名称： 湖南省生理科学学会2004年度学术年会

会议时间： 2004-12

会议地点： 中国湖南株洲

摘要： <正>目的:用贵州小香猪建立动脉粥样硬化动物模型,探讨动脉粥样硬化小型猪三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的变化。方法:采用血管内膜损伤法加高脂高胆固醇饲料喂养贵州小香猪,建立动脉粥样硬化动物模型。血浆总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的浓度均用氧化酶法测定。采用逆转录聚合酶链反应检测ABCA1及肝X受体α mRNA水平,Western印迹和免疫组织化学检测ABCA1及肝X受体α蛋白

语种： 中文

作者： 甘露;刘录山;唐朝克;万载阳;危当恒;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2004年12(5):541-544 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001;[万载阳; 危当恒; 杨永宗; 刘录山; 唐朝克; 万腊香; 甘露] 南华大学

关键词： 病理学与病理生理学;肥大细胞对胶原表达的影响;逆转录聚合酶链反应;肥大细胞;平滑肌细胞;胶原;动脉粥样硬化

摘要： 目的检测大鼠腹腔肥大细胞(mast cell, MC)对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 SD大鼠体重约200 g,雌雄不限,供采集MC和原代培养平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC).采用梯度密度离心分离MC,提取MC上清液(含MC释放的各种炎症介质).用MC上清液和氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)处理SMC,实验分四组:对照组SMC在5 mL含10%小牛血清的DMEM中培养48 h;oxLDL组SMC在5 mL含10%小牛血清的DMEM中(含oxLDL,终浓度为100 mg/L)培养48 h;MC上清液组SMC在5 mL含10%小牛血清的MC上清液(由含1×106个MC的细胞悬液提取)中培养48 h;MC上清液+oxLDL组SMC在5 mL含10%小牛血清的MC上清液(由含1×106个MC的细胞悬液提取)中(含oxLDL,终浓度为100 mg/L)培养48 h.采用油红O染色检测SMC泡沫化.RT-PCR检测SMC Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达,PCR引物序列Ⅰ型胶原为5'-GAC ACT GAA CCC TTT GTA ATG-3'和5'-GTG AAA CTC CCG TCT GCT-3',扩增片段长度为399 bp;Ⅲ型胶原引物序列为5'-AGC GGA GAA TAC TGG GTT-3'和5'-TGT AAT GTT CTG GGA GGC-3',扩增片段长度为288 bp;内参照采用β-actin,引物序列为5'-GTG GGG CGC CCC AGG CAC CA-3'和5'-CTC CTT AAT GTC ACG CAC GAT TTC-3',扩增片段长度为548 bp.免疫细胞化学染色检测SMC Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达.结果油红O染色显示MC上清液可加速SMC泡沫化.RT-PCR结果发现,与对照组SMC相比,用oxLDL或MC上清液分别单独处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达均降低,用oxLDL和MC上清液同时处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低更明显.免疫细胞化学染色显示,对照组SMC细胞浆内有大量棕色颗粒,颗粒粗大而染色深,说明对照组Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达为强阳性;用oxLDL或MC上清液分别单独处理SMC 8 h后,细胞浆内棕色颗粒少而染色浅,说明Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达均明显降低;用oxLDL和MC上清液同时处理SMC 48 h后,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达降低更明显.结论 MC在体外抑制SMCⅠ型胶原和Ⅲ型胶原表达,并且能协同oxLDL对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用.因此MC释放的炎症介质也许参与了动脉粥样斑块纤维帽的重构.

语种： 中文

作者： 廉馨;席守民;张弛;唐朝克;尹卫东

期刊： 中国动脉硬化杂志,2004年12(4):387-391 ISSN：1007-3949

作者机构： [廉馨; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所;[席守民; 张弛; 尹卫东] 南华大学生物化学与分子生物学教研室;南华大学生物化学与分子生物学教研室 湖南省衡阳市421001

关键词： 病理学与病理生理学;NO-1886对过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶和肿瘤坏死因子α基因表达的影响;逆转录聚合酶链反应;过氧化体增殖物激活型受体;脂蛋白脂肪酶;肿瘤坏死因子α

摘要： 为了探讨脂蛋白脂肪酶活化剂NO-1886对高脂高糖饮食喂养贵州小香猪过氧化物体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子α表达的影响,选择雄性贵州小香猪15头,随机分为3组.正常对照组喂普通饲料;高脂高糖组喂高脂高蔗糖饲料;治疗组喂高脂高蔗糖饲料4个月后加1%NO-1886治疗.8个月后处死动物,采用Trizol提取组织总RNA,逆转录聚合酶链反应检测过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子α mRNA的表达.结果发现,正常对照组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达较低.高脂高糖组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达增强,NO-1886使高脂高糖喂养增强肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α表达的作用减弱;在脂肪组织,治疗组脂蛋白脂肪酶的表达水平最高,分别比正常对照组和高脂高糖组高27%和20%;NO-1886抑制高脂高糖喂养小香猪脂肪组织肿瘤坏死因子α的表达.结果提示,NO-1886能促进小香猪脂肪组织脂蛋白脂肪酶的表达,显著抑制脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达,高调脂肪组织过氧化体增殖物激活型受体γ,减弱肝脏和肌肉过氧化体增殖物激活型受体α的表达,是NO-1886有效降低血浆游离脂肪酸和肿瘤坏死因子α水平可能的机制.

语种： 中文

作者： Tang, CK;Yi, GH;Wang, Z;Wang, Y;Liu, LS;...

期刊： 生物化学与生物物理进展,2004年31(2):127-133 ISSN：1000-3282

通讯作者： Yang, YZ

作者机构： [Wan, ZY; Yuan, ZH; Wang, Z; Wang, Y; Ruan, ZG; Tang, CK; Liu, LS; Yang, YZ; Yi, GH] Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Yang, YZ] N;Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： 三磷酸腺苷结合盒转运体A1;流式细胞术;胆固醇流出;低密度脂蛋白;泡沫细胞;Tangier病;干扰素-Γ;动脉粥样硬化

摘要： 以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象 ,观察干扰素 γ （IFN γ）对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1 （ABCA1 ）表达的影响 .以便探讨IFN γ在动脉粥样硬化发生发展中的作用 .采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出 ,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量 .运用逆转录 多聚酶链反应和蛋白质印迹分别检测ABCA1mRNA与ABCA1蛋白质的表达 ,采用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度 .发现IFN γ引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性增加 ,而ABCA1mRNA和蛋白质表达、细胞平均ABCA1荧光强度以及apoA 1介导的胆固醇流出呈时间依赖性减少 ,细胞内胆固醇增多 .结果表明IFN γ抑制THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及细胞内胆固醇流出 ,同时增加细胞内胆固醇聚积

语种： 中文

作者： 杨峻浩;莫中成;唐朝克

作者机构： [杨峻浩; 莫中成; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所

会议名称： 国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议

会议时间： 2004

摘要： <正>长期以来人们解释HDL抗动脉粥样硬化作用都是围绕着胆固醇逆转运(RCT)过程来进行。在RCT中,HDL介导外周细胞内过剩的游离胆固醇(FC)发生移动,在血浆中经过一系列反应后,胆固醇由HDL运送到肝脏从而分泌入胆汁。在RCT中,FC在细胞与细胞外受体之间的流动有两个重要步骤:(1)FC从外周细胞内流出;(2)HDL-FC运送到肝脏。细胞内FC流出途径现已阐明有3条途径:(1)水相扩散;(2)

语种： 中文

作者： 唐国华;龙治峰;贺修胜;唐朝克

期刊： 中华病理学杂志,2004年33(6):575-576 ISSN：0529-5807

作者机构： [唐国华; 龙治峰; 贺修胜; 唐朝克] 南华大学科研试验中心;南华大学科研试验中心 421001衡阳

关键词： 流式细胞仪检测;石蜡切片;诊断;M细胞;细胞DNA;细胞群体;流式细胞仪技术;碱基对;DNA双螺旋结构;核酸

摘要： 在肿瘤研究中,应用流式细胞仪技术分析肿瘤细胞的DNA含量及周期细胞群体数目,已成为肿瘤临床诊断、疗效评价及预后推测的重要参考依据[1,2].DNA双螺旋结构碱基对与某些核酸荧光染料有良好的亲和力,在激发光的激发下,产生特定的荧光,运用流式细胞仪检测并分析这些荧光强度,从而了解细胞群体中各周期的分布状况,即G0/G1期、S期、G2/M细胞所占的百分比例.……

语种： 中文

作者： 高治平;李波平;唐朝克;黄红林;胡弼;...

期刊： 医学教育研究与实践,2004年12(2):135-137 ISSN：2096-3181

作者机构： [黄红林; 李波平; 高治平; 廖端芳; 唐朝克; 胡弼] 南华大学

关键词： 医学机能学;实验教学;教学改革;素质教育;课堂教学

摘要： 在专业技术教育中,实施素质教育是培养医学科技创新人才的有效途径之一.我们以本校综合性医学机能实验教学已取得的成效为载体,就如何将素质教育贯穿、渗透、落实到实验教学改革实践中进行探讨,提出了进一步深化机能实验教学改革,实施素质教育,培养创新人才的措施与方法.

语种： 中文

作者： 易光辉;米五平;唐朝克;莫中成;曾颖;...

期刊： 中国糖尿病杂志,2004年12(4):290-292 ISSN：1006-6187

作者机构： [易光辉; 米五平; 唐朝克; 莫中成; 曾颖; 谭玉林; 杨永宗] 南华大学心血管病研究所;南华大学心血管病研究所 421001衡阳

关键词： 糖基化终产物;血管内皮细胞;过氧化物酶体增生物活化受体;基因表达

摘要： 目的探讨糖基化终产物(AGEs)对内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体(PPAR)表达的影响. 方法以体外培养的人内皮细胞系(ECV)-304为研究对象,应用RT-PCR、Western印迹方法观察不同浓度AGEs对内皮细胞PPARα、PPARγ表达的影响. 结果 ECV-304有PPARγ、PPARα的基础表达,AGEs可使PPARγ的mRNA及蛋白表达上调. 结论 AGEs对PPAR表达具有上调作用,可能参与糖尿病致动脉粥样硬化的病理过程.

语种： 中文

作者： Tang, CK;Xi, SM;Yin, WD;He, XS;Liu, DP;...

期刊： 生物化学与生物物理进展,2004年31(6):543-549 ISSN：1000-3282

通讯作者： Yang, YZ

作者机构： [Yang, YZ] Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Res, Hengyang 421001, Peoples R China.;Nanhua Univ, Sch Life Sci & Technol, Dept Biochem & Mol Biol, Hengyang 421001, Peoples R China.;Nanhua Univ Med Sch, Dept Pathol, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Yang, YZ] N;Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Res, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： 三磷酸腺苷结合盒转运体A1;游离脂肪酸;糖尿病;小型猪

摘要： 用贵州小香猪建立2型糖尿病动物模型,探讨糖尿病小型猪三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的变化.采用高脂高蔗糖饲料喂养贵州小香猪,建立2型糖尿病动物模型.血浆总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和葡萄糖的浓度均用氧化酶法测定,血浆游离脂肪酸(FFA)用比色法测定,采用逆转录-聚合酶链反应、蛋白质印迹和免疫组织化学分别检测ABCA1mRNA和蛋白质的表达.喂养6个月后,实验组与正常对照组比较,空腹血糖值明显升高;空腹胰岛素水平在头3个月轻度升高,在第6个月末其水平降低;血清总胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸水平升高;肝组织、冠状动脉、肾组织ABCA1表达上调,同时观测到糖尿病小型猪肝组织LXRα表达上调.结果提示高脂高蔗糖饲料可引起小型猪脂质和糖代谢紊乱,并导致肝组织、冠状动脉和肾组织ABCA1表达上调以及肝组织LXRα表达上调.

语种： 中文

作者： 杨峻浩;莫中成;唐朝克

期刊： 生命的化学,2004年24(4):337-339 ISSN：1000-1336

作者机构： [杨峻浩; 莫中成; 唐朝克] 南华大学心血管病研究所;南华大学心血管病研究所 衡阳421001

关键词： 清道夫受体-BI;胆固醇流出

摘要： 清道夫受体-BI(SR-BI)和腺三磷结合盒转运体A1(ABCA1)在血浆脂蛋白的生成和代谢以及维持细胞内胆固醇平衡中起着重要的作用.清道夫受体-BI既介导细胞内游离胆固醇(FC)流出也介导细胞外FC流入.ABCA1促进细胞内FC和磷脂流出,也促进apoA-Ⅰ的酯化和新生HDL的生成.

语种： 中文

作者： 易光辉;唐朝克;莫中成;杨永宗

期刊： 生命的化学,2004年24(3):240-242 ISSN：1000-1336

作者机构： 南华大学心血管疾病研究所,衡阳,421001;[莫中成; 易光辉; 杨永宗; 唐朝克] 南华大学

关键词： 过氧化酶体增殖物激活型受体(PPAR);动脉粥样硬化

摘要： 动脉粥样硬化(AS)是一种以动脉壁脂质蓄积为特征的复杂病变过程.过氧化酶体增殖物激活型受体(PPAR)是核内孤儿受体家族成员,它作为脂质和脂蛋白代谢的调节物,可以调控血浆胆固醇及甘油三酯的水平、促进脂肪细胞分化、影响巨噬细胞内胆固醇内稳态、稳定斑块、抑制血小板聚积从而影响AS的发生和发展.PPAR可通过对基因转录的调控来调理脂质代谢紊乱,并在血管壁水平直接产生抗AS作用.

语种： 中文

作者： 王燕;易光辉;唐朝克;王佐;莫中成;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2004年12(5):524-528 ISSN：1007-3949

作者机构： [王燕; 易光辉; 唐朝克; 王佐; 莫中成; 陈欣; 杨永宗] 南华大学心血管病研究所;南华大学心血管病研究所 湖南省衡阳市421001

关键词： 病理学与病理生理学;高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化作用;基因表达检测;高密度脂蛋白;巨噬细胞;过氧化体增殖物激活型受体

摘要： 为探讨高密度脂蛋白2和高密度脂蛋白3对THP-1巨噬细胞过氧化体增殖物激活型受体γ和CD36表达及脂质蓄积的影响.取新鲜抗凝血浆,用超速离心术进行密度梯度离心,收集低密度脂蛋白、高密度脂蛋白2和3.将氧化型低密度脂蛋白分别与高密度脂蛋白2和3共孵育THP-1巨噬细胞,用油红O染色及高效液相分析法观测细胞内脂质蓄积程度;用逆转录聚合酶链反应检测CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达;用Western blotting检测CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ蛋白的表达.结果发现,与单独用氧化型低密度脂蛋白和THP-1孵育相比,用高密度脂蛋白2、高密度脂蛋白3分别与氧化型低密度脂蛋白共孵育THP-1可使细胞内脂质蓄积明显减少,过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA及蛋白表达上调,CD36 mRNA及蛋白表达下调.而高密度脂蛋白3比高密度脂蛋白2作用更明显.结果提示,高密度脂蛋白2和3对氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞脂质蓄积有显著抑制作用,而高密度脂蛋白3的作用更强.其机制与高密度脂蛋白可以增强过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA和蛋白表达上调及过氧化体增殖物激活型受体γ磷酸化,进而抑制过氧化体增殖物激活型受体γ的应答基因CD36 mRNA及蛋白表达有关.

语种： 中文

作者： 席守民;廉馨;王宗保;张秋菊;唐朝克;...

期刊： 中华内分泌代谢杂志,2004年20(6):551-555 ISSN：1000-6699

作者机构： 河南科技大学医学院;[尹卫东; 王宗保; 廉馨; 张秋菊] 421001,湖南,衡阳,南华大学生命科学与技术学院生物化学与分子生物学教研室;南华大学心血管病研究所;[席守民] 河南科技大学;[唐朝克] 南华大学

关键词： 脂细胞;肿瘤坏死因子α;脂肪酸类,非酯化;糖尿病;小型猪

摘要： 目的用高脂高糖饲养的贵州小香猪观察脂蛋白脂酶活化剂NO-1886调节糖、脂代谢的作用.方法采用高脂高蔗糖饲料喂养贵州小香猪,并用NO-1886进行治疗,观察其体重、血糖、胰岛素、血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、脂肪细胞形态的变化.结果与正常对照组相比,高脂高蔗糖喂养使小香猪脂肪细胞体积变大,血浆TNF-α和FFA以及空腹血糖水平均增高(P＜0.05～P＜0.01),而且引起胰岛素抵抗.在高脂高蔗糖饲料中添加了1%NO-1886后,与高脂高蔗糖组相比,脂肪细胞增大被抑制,血浆TNF-α、FFA和空腹血糖的浓度均显著降低(均P＜0.05),血浆葡萄糖清除率以及胰岛素分泌急性相都有了明显改善.结论NO-1886可能通过抑制脂肪蓄积、降低血浆TNF-α和FFA的浓度而改善高脂高蔗糖饲料引起的小型猪的糖代谢紊乱.

语种： 中文

作者： Tang, CK;Yi, GH;Ruan, CG;Yang, YZ*

期刊： 生物化学与生物物理进展,2004年31(5):398-401 ISSN：1000-3282

通讯作者： Yang, YZ

作者机构： [Tang, CK; Ruan, CG; Yang, YZ; Yi, GH] Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Yang, YZ] N;Nanhua Univ, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： 三磷酸腺苷结合盒转运体;胆固醇;吸收;植物甾醇

摘要： 人们对控制胆固醇吸收和血浆植物甾醇水平的分子基础了解尚少.ABCG5和ABCG8的发现使得理解甾醇吸收的分子基础获得突破.ABCG5和ABCG8主要涉及植物甾醇代谢,而其他基因涉及胆固醇吸收.最近,一种新胆固醇吸收阻止剂(ezetimibe)的问世,给胆固醇吸收和血浆植物甾醇水平基因控制研究提供新的亮点.主要综述胆固醇吸收和血浆植物甾醇水平的基因控制,关注调节它们的共同点和不同点,讨论这一领域的最近发展和展望未来希望.

语种： 中文

作者： 易光辉;莫中成;陈欣;唐朝克;曾颖;...

作者机构： [易光辉; 莫中成; 陈欣; 唐朝克; 曾颖; 谭玉林; 杨永宗] 南华大学心血管疾病研究所

会议名称： 国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议

会议时间： 2004

摘要： <正>目的:用高脂饮食喂养贵州小型香猪,探讨高脂饮食小型猪清道夫受体CD36以及过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)表达的变化。方法:本实验采用颈总动脉内膜拉伤和喂饲高脂高胆固醇饲料喂养贵州小型香猪,每2个月末称体重并从禁食过夜的小型猪眶静脉窦采集血样,检测血脂浓度。血浆TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇的浓度均用氧化酶法测定。喂养12个月后处死动

语种： 中文

作者： 林书典;戴爱国;唐朝克

期刊： 中华结核和呼吸杂志,2004年27(5):348-349 ISSN：1001-0939

作者机构： 湖南省老年医院湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室;南华大学心血管病研究所 410001长沙;现为南华大学2001级呼吸内科研究生

关键词： Γ谷氨酰半胱氨酸合成酶;大鼠;慢性阻塞性肺疾病;表达;发病机制;抗氧化剂谷胱甘肽

摘要： 研究表明,氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要发病机制之一.肺组织中重要的抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)对纠正氧化失衡,保护肺组织免受氧化损伤起关键作用.γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是GSH合成的限速酶,调控GSH生成的速度和量.为此,我们的实验初步探讨γ-GCS在大鼠COPD中的作用.

语种： 中文

作者： 甘露;唐朝克;刘录山;万载阳;危当恒;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2004年12(2):205 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001;[万载阳; 危当恒; 杨永宗; 刘录山; 唐朝克; 万腊香; 甘露] 南华大学

关键词： 病理学与病理生理学;氧化型低密度脂蛋白;肥大细胞;大鼠;动脉粥样硬化

摘要： 目的观察氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导大鼠腹腔肥大细胞(MC)脱颗粒.方法 SD大鼠体重约200 g,雌雄不限,供采集MC.采用梯度密度离心分光光度仪检测细胞上清液和细胞裂解液组胺含量,计算组胺释放率,寻求oxLDL致MC脱颗粒的最佳浓度.用最佳浓度的oxLDL处理MC进行实验,将分离提纯的MC于含10%小牛血清和100 g/L oxLDL的DMEM中培养48 h.通过倒置显微镜、甲苯胺蓝染色、透射电镜观察肥大细胞脱颗粒状态.结果 oxLDL浓度依次为0、50、100及200 g/L时,肥大细胞组胺释放率逐渐增高,分别为4.38%±1.58%,39.98%±2.21%,52.99%±1.13%,71.70%±3.02%.以100 mg/L oxLDL处理MC后,倒置显微镜观察发现对照组MC多数呈半贴壁生长,细胞为球形,形态完整,边界清晰,细胞浆内有大量透亮粗大颗粒,有部分细胞贴壁较牢,呈梭形;处理组MC有较多细胞形态不规则,边界不清,有颗粒释放到细胞外.甲苯胺蓝染色显示,处理组有较多MC脱颗粒,细胞膜不完整,细胞内颗粒稀疏,而细胞周围有数量不等的紫红色颗粒;对照组仅有少部分MC脱颗粒,细胞呈球形,细胞膜完整,细胞核染成蓝色,细胞浆内有大量紫红色的粗大颗粒,颗粒电子密度高;处理组MC形态不规则,细胞浆内颗粒稀疏,多数颗粒电子密度低,只剩下有膜包被的空泡.结论氧化型低密度脂蛋白能透导大鼠腹腔肥大细胞体外脱颗粒.

语种： 中文

作者： 席守民;尹卫东;廉馨;张秋菊;唐朝克;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2004年12(2):182 ISSN：1007-3949

作者机构： [廉馨; 易光辉; 唐朝克] 南华大学;[尹卫东] 南华大学,生命科学与技术学院生物化学与分子生物学教研室南华大学,医学院心血管病研究所,湖南省衡阳市,421001;[席守民; 张秋菊] 南华大学,生命科学与技术学院生物化学与分子生物学教研室

关键词： 病理生理学;糖尿病;视网膜;血管内皮生长因子;小型猪;葡萄糖代谢

摘要： 目的观察血管内皮生长因子(VEGF)在早期糖尿病视网膜病变中的表达以及NO-1886对2型糖尿病小型猪血糖的影响,探讨NO-1886对视网膜VEGF的作用.方法贵州小香猪共15头,随机分为3组:正常对照组喂普通猪饲料(control diet, CD),实验组喂高脂高蔗糖饲料(high fat/high sucrose diet, HFSD),治疗组(HFSD+1%NO-1886)前3个月喂高脂高蔗糖饲料,从第4个月初开始,在高脂高蔗糖饲料里加1%NO-1886,实验周期为8个月.用免疫组织化学和RT-PCR技术检测VEGF在早期糖尿病小型猪视网膜的表达以及观察NO-1886对糖尿病小型猪视网膜VEGF的影响.结果 VEGF免疫阳性反应在正常对照组视网膜中表达较弱,其表达范围局限于视网膜节细胞层的部分细胞胞浆.而在实验组,VEGF蛋白的表达比正常对照组明显增加,胞质呈深棕黄色,且阳性反应细胞数增多.除了在内核层和节细胞表达外,VEGF阳性反应又在视杆内节和色素上皮细胞中出现,使其表达的空间范围比正常对照组明显增加,正常对照组VEGF免疫阳性反应分布于靠近视网膜内核层的少数神经节细胞的胞浆中.而实验+NO-1886组VEGF免疫阳性仅见神经节细胞胞质中,阳性细胞数明显少于实验组,但较正常对照组为多.正常对照组VEGF mRNA表达很低,平均仅有48.4 OD;实验组VEGF mRNA表达最高,平均约86.6 OD;而实验+NO-1886组VEGF mRNA表达介于实验组和正常对照组之间,约为61 OD.与实验组比较差异具有显著性意义(P<0.01).结论脂蛋白脂酶活化剂NO-1886有降低高脂高糖饮食诱导的2型糖尿病贵州小香猪的血糖水平,减轻胰岛素抵抗和改善葡萄糖代谢紊乱的作用;通过降低血糖,改善视网膜组织缺氧,抑制VEGF mRNA的表达及其蛋白的合成,从而抑制视网膜新生血管的形成,达到早期预防糖尿病视网膜并发症的目的.

语种： 中文

作者： 莫中成;陈欣;易光辉;唐朝克;曾颖;...

作者机构： [莫中成; 陈欣; 易光辉; 唐朝克; 曾颖; 谭玉林; 杨永宗] 南华大学心血管疾病研究所

会议名称： 国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议

会议时间： 2004

摘要： <正>目的:用高脂饮食喂养贵州小香猪,探讨高脂饮食小香猪B类清道夫受体I(SR-BI)表达的变化,为进一步阐明动脉粥样硬化的发病机制提供实验依据。方法:本实验采用颈总动脉内膜拉伤和喂饲高脂高胆固醇饲料喂养贵州小香猪,每2个月末称体重并从禁食过夜的小香猪眶静脉窦采集血样,检测血脂浓度。血浆TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇的浓度均用氧化酶法测定。喂养12个月后处死动物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-P

语种： 中文