作者： 任重;赵战芝;彭湘萍;黄宜娥;唐志晗;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(07):586-586 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

关键词： 硫化氢;氧化型低密度脂蛋白;N-乙酰半胱氨酸;人脐静脉内皮细胞;凋亡;细胞线粒体膜电位;细胞内活性氧

摘要： 目的 探讨硫化氢对抗氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及有关机制。方法人脐静脉内皮细胞分别经不同浓度（25、50、100、200μmol／L）和不同时间（6、12、24h）硫氢化钠预孵育24h后加入100mg／L氧化型低密度脂蛋白处理24h，Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡，罗丹明123染色检测细胞线粒体膜电位变化，双氢罗丹明123染色检测细胞内活性氧的含量变化，WesternBlot检测细胞Caspase-3和Caspase-9蛋白质的表达。

语种： 中文

作者： 袁中华;黄谙非;姜志胜;易光辉;唐朝克;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(7):595 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学医学院心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

关键词： 蛋白激酶C;乙酰辅酶A;胆固醇酰基转移酶;逆转录病毒载体;动脉粥样硬化

摘要： 目的通过建立高表达adipophilin基因的RAW264．7细胞株，观察高表达adipophilin细胞内ACAT1表达的变化，探讨adi-pophilin是否通过PKC信号途径作用于ACAT1，阐明adipophilin促进泡沫细胞形成的机制。方法构建pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒载体，并用酶切和PCR鉴定。将该重组质粒用梭华-Sofast基因转染试剂转染PA317包装细胞，获得pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒。

语种： 中文

作者： 王仁;姜志胜;王佐;赵战芝;李国华;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年17(6):426-430 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学病理生理学教研室,湖南省衡阳市,421001;南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南省衡阳市,421001;[杨向东; 王仁; 赵战芝; 李国华; 王佐; 姜志胜] 南华大学

关键词： 生物信息学分析;动脉粥样硬化;突触相关蛋白;跨膜区;功能结构域

摘要： 为了对新的人突触相关蛋白FRG4进行全长克隆及生物信息学分析,从人胎肝文库PCR扩增FRG4基因全长cDNA序列,用生物信息学方法 对FRG4基因进行基因组结构分析、多序列同源性比较、跨膜区段、亲疏水性分析、功能结构域预测等.结果 表明cDNA文库基础上运用热启动PCR获得FRG4全长cDNA序列,生物信息学分析显示FRG4基因与人类的突触相关蛋白有99%同源性;定位在X染色体的短臂2区2带2亚带2次亚带;由9个外显子和8个内含子组成;无跨膜区段;有一结构域BSD;该基因编码蛋白可能为一水溶性蛋白.

语种： 中文

作者： 肖文虎;张红;彭湘萍;刘录山;姜志胜

期刊： 中国生物化学与分子生物学报,2009年25(3):213-218 ISSN：1007-7626

作者机构： [肖文虎; 张红; 彭湘萍; 刘录山; 姜志胜] 南华大学心血管病研究所

关键词： 胆固醇代谢;低密度脂蛋白受体;分子生物学

摘要： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因属于前蛋白转化酶(PC)家族,由信号肽、前结构域、催化结构域和羧基末端结构域组成.大量研究发现,PCSK9能介导低密度脂蛋白受体(LDLR)降解,调节血浆LDL胆固醇(LDL-C)水平;而PCSK9的两类主要突变,功能获得型、功能缺失型可分别导致高胆固醇血症和低胆固醇血症.因而研究PCSK9对相关心血管疾病的防治有重要意义.PCSK9结构特性与其生化功能密切相关,突变致使其调节胆固醇代谢的机制更为复杂.本文旨在总结PCSK9结构与功能的分子生物学特性.并指出目前研究中存在的问题,以利对PCSK9的进一步探索.

语种： 中文

作者： 刘艳文（综述）;姜志胜（审校）

期刊： 心血管病学进展,2009年30(3):467-470 ISSN：1004-3934

作者机构： 南华大学心血管病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南,衡阳,421001;[刘艳文（综述）; 姜志胜（审校）] 南华大学

关键词： 动脉粥样硬化钙化;斑块;钙化模型

摘要： 血管钙化是异位钙化一种,分为中膜钙化和内膜钙化,中膜钙化相关的疾病有肾病、糖尿病等,而内膜钙化主要与动脉粥样硬化有关.血管钙化亦是心血管疾病的一危险因素,是慢性炎症反应的重要指标,动脉粥样硬化钙化即内膜钙化则充分体现了该作用.它的程度直接与粥样硬化疾病的斑块负荷有关.因此受到研究者广泛的关注,现就动脉粥样硬化钙化发生机制、相关因素及实验模型等方面做一综述.

语种： 中文

作者： Feng, Xuejuan;Chen, Yu;Zhao, Jing;Tang, Chaoshu;Jiang, Zhisheng;...

期刊： Biochemical and Biophysical Research Communications,2009年380(1):153-159 ISSN：0006-291X

通讯作者： Geng, Bin

作者机构： [Feng, Xuejuan; Jiang, Zhisheng] Nan Hua Univ, Inst Cardiovasc Dis, Hengyang 421001, Peoples R China.;[Geng, Bin; Chen, Yu; Tang, Chaoshu] Peking Univ, Hosp 1, Inst Cardiovasc Res, Beijing 100034, Peoples R China.;[Geng, Bin; Zhao, Jing; Chen, Yu; Tang, Chaoshu] Peking Univ, Hlth Sci Ctr, Dept Physiol & Pathophysiol, Beijing 100034, Peoples R China.;[Geng, Bin] Peking Univ, Hosp 1, Inst Cardiovasc Res, Xishiku St 8, Beijing 100034, Peoples R China.

通讯机构： [Geng, Bin] P;Peking Univ, Hosp 1, Inst Cardiovasc Res, Xishiku St 8, Beijing 100034, Peoples R China.

关键词： Adipose;Cystathionine gamma lyase;Glucose uptake;Hydrogen sulfide;Insulin resistance

摘要： Recent data suggested that endogenous hydrogen sulfide (H2S) contributes to the pathogenesis of diabetes. Here, we identified that cystathionine gamma lyase (CSE) was expressed in adipose tissue in rats and endogenously generated H2S. The CSE/H2S system exists in both rat adipocytes and pre-adipocytes. This system was up-regulated with aging, although a high level of glucose down-regulated the system in a concentration- and time-dependent manner. H2S inhibited the basal and insulin-stimulated glucose uptake of mature adipocytes, whereas administration of CSE inhibitors enhanced the glucose uptake of adipocytes. The PI3K but not KATP channel pathway is involved in the inhibitory effect of H2S on glucose uptake. Finally, in fructose-induced diabetes in rats, we confirmed the up-regulated CSE/H2S system in adipose tissue, which was negatively correlated with glucose uptake in this tissue. Our findings suggest that H2S might be a novel insulin resistance regulator. © 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

语种： 英文

作者： 王祥（综述）;姜志胜（审校）

期刊： 中国现代医药杂志,2009年11(11):119-121 ISSN：1672-9463

作者机构： 南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南衡阳,421001

关键词： 动脉粥样硬化钙化;易损斑块破裂;硫化氢;动脉粥样硬化斑块;病理学形态;斑块稳定性;钙化结节

摘要： 动脉粥样硬化临床重要事件是血栓的形成，易损斑块破裂是导致这一事件发生的重要机制。VirmaniR等观察易损斑块病理学形态发现，钙化结节是其形态之一，但是钙化对斑块的具体作用一直存在争议，现在认为钙化对斑块的破裂是把“双刃剑”，钙化初期即形成过程中，由于肩部受力不均，导致斑块易破裂，而当钙化呈弥漫性时，则可增加斑块的稳定性。但是钙化仍可以作为动脉粥样硬化斑块稳定性的独立的预测因子。Huang等认为钙化不是影响了某个动脉粥样硬化斑块．

语种： 中文

作者： 刘录山;潘利红;杨琼;武春艳;江璐;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年17(1):4-8 ISSN：1007-3949

作者机构： [刘录山; 杨琼; 武春艳; 江璐; 唐志晗; 王佐; 姜志胜] 南华大学心血管病研究所;[潘利红] 南华大学附属第二医院神经内科

关键词： 动脉粥样硬化;沙利度胺;炎症;新西兰兔

摘要： 目的 研究沙利度胺对的动脉粥样硬化病变形成的押制作用.方法 新西兰兔分为3组,每组13只.正常饮食组给予普通饮食;高脂组给予2%的高胆固醇饮食;高脂加药组给予2%的高胆固醇饮食+20 mg/kg沙利度胺,2个月后宰杀动物,取整条主动脉行苏丹IV染色检测斑块面积,油红O染色和HE染色检测斑块的病变程度,油红O染色检测肝脏内脂质蓄积情况,不同时间点采血,检测总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和甘油三酯等血脂指标水平,ELISA方法 检测血液中肿瘤坏死因子α水平.结果 (1)高脂饮食喂养新西兰兔2个月后,总胆固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白等指标较正常饮食组明显升高.苏丹Ⅳ染色高脂组有36.7%±4.3%红染面积,而正常正常饮食组基本上见不到红染区.油红O染色高脂组血管内膜有大量被染成黄色的脂滴存在,而在正常饮食组几乎没有.HE染色高脂组可以看到明显的动脉粥样硬化斑块存在,而正常饮食组没有.这些指标都表明动脉粥样硬化模型制作成功.(2)与高脂组比较,高脂加药组病变面积明显减少,动脉粥样硬化斑块内泡沫细胞数量以及脂质含量都明显减少.沙利度胺能显著减轻动脉粥样硬化病变程度.(3)与高脂组比较,高脂加药组甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白等血脂指标差异无显著性.沙利度胺不影响血液脂质水平.(4)与高脂组比较,高脂加药组肝脏脂质含量差别不大.沙利度胺不影响肝脏脂质代谢.(5)与高脂组比较,高脂加药组肿瘤坏死因子α水平明显下降.结论 沙利度胺具有抑制动脉粥样硬化形成的作用,其机制与脂质代谢调节无关,而可能主要是与沙利度胺能下调肿瘤坏死因子α的表达有关.

语种： 中文

作者： 杨琼;武春艳;江璐;唐志晗;姜志胜;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(07):589-589 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

关键词： 剪切应力;动脉粥样硬化;套环;新西兰兔;颈总动脉

摘要： 目的 论证不同程度和不同形式的剪切应力的改变可以引起不同程度的动脉粥样硬化病变以及阐明体内异常剪切应力对血管壁Caveolin-1和VEGFR-2表达的调节作用。方法给予26只新西兰兔右颈总动脉硅胶管套环后雌雄均等分为2组，对照组（给予正常饮食）和高脂组（2％的高胆固醇饮食），9周后处死动物，0周和第9周收集血清测量总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和甘油三酯；

语种： 中文

作者： 武春艳;江璐;唐志晗;姜志胜;刘录山

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(07):587-587 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

关键词： THP-1源性巨噬细胞;凋亡;Caspase通路

摘要： 目的 研究PCSK9调控氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡的机制，进而探索PCSK9在动脉粥样硬化中的作用。方法使用不同浓度的氧化型低密度脂蛋白处理THP-1源性巨噬细胞不同时间，应用Lipofectamine2000转染PC-SK9siRNA和PCSK9表达载体进入THP-1源性巨噬细胞中作用24h后再加入80mg／L氧化型低密度脂蛋白处理24h，West—emblot检测Bcl-2、Bax、Caspase3蛋白的表达；

语种： 中文

作者： 武春艳;刘录山;姜志胜

期刊： 东南大学学报(医学版),2009年28(5):446-450 ISSN：1671-6264

作者机构： 南华大学,心血管疾病研究所、动脉硬化湖南省重点实验室,湖南,衡阳,421001;[武春艳; 刘录山; 姜志胜] 南华大学

关键词： 动脉粥样硬化;剪切应力;信号转导;内皮细胞

摘要： 1 内皮的结构与功能 血管内皮是位于血管壁与血液接触的单层细胞,是循环血液与血管壁之间的重要屏障,除了调节血管内外物质交换之外,还有许多重要功能,包括:合成和释放血管活性物质,摄取、转化或灭活血液循环中或者血管局部的生物活性分子,调节血管平滑肌的舒张收缩活动等功能.内皮细胞的功能不仅受生长因子、激素等生化物质的调控,还受到血流机械作用力的影响,后者通过激活相应的信号通路调节血管内皮和平滑肌的结构及功能[1].

语种： 中文

作者： 武春艳;唐志晗;刘录山;姜志胜

期刊： 中国生物化学与分子生物学报,2009年25(11):991-996 ISSN：1007-7626

作者机构： [武春艳; 唐志晗; 刘录山; 姜志胜] 南华大学心血管病研究所

关键词： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9;高胆固醇血症;药理学靶点

摘要： 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因编码神经凋亡调节转化酶即NARC1,通过影响肝LDLR水平,在胆固醇代谢中发挥了重要的作用.其功能获得型突变使血浆胆固醇水平增高,而功能缺失型突变降低胆固醇水平.流行病学调查显示,高胆固醇血症是动脉粥样硬化和心脏病的主要危险因素.一些患者运用当前的降胆固醇药物治疗仍不能达到推荐的目标LDL水平,PCSK9作为新的降脂靶点引起了广泛的关注.本文将对PCSK9的结构、功能和药理学靶点进行综述.

语种： 中文

作者： 姜志胜

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年17(7):505-509 ISSN：1007-3949

作者机构： [姜志胜] 南华大学心血管病研究所

会议名称： 第10次动脉粥样硬化学术会议

会议时间： 2009-07-31

会议地点： 呼和浩特

会议论文集名称： 第10次动脉粥样硬化学术会议论文集

关键词： 动脉粥样硬化;前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因(PCSK9);神经细胞凋亡调节转化酶-1(NARC-1);低密度脂蛋白受体;药物干预;靶点

摘要： PCSK9是一个新发现不久的与脂质代谢调节密切相关的基因.目前对其分子结构、分布、基因突变及表达调节和通过调节肝脏低密度脂蛋白受体的降解等功能特性有了一定的了解.但是由于对PCSK9作用底物目前缺乏系统的研究,使得对其功能研究受到了局限.但是有一点可以肯定的是,针对PCSK9的药物研发已经且必将是动脉粥样硬化防治领域的一个新突破.

语种： 中文

作者： 彭湘萍;姜志胜;任重;赵战芝;黄宜娥;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(7):588-589 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

关键词： 高密度脂蛋白;氧化型高密度脂蛋白;人脐静脉内皮细胞;细胞损伤;组织因子途径抑制物1

摘要： 目的 观察高密度脂蛋白（HDL）及其亚型氧化修饰后对人脐静脉内皮细胞的损伤作用和对组织因子途径抑制物1（TFPI-1）表达的影响并初步探讨其机制。方法（1）人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，hUVEC）分别与300mg／LOX—HDL、OX—HDL2和OX—HDL3共孵育24h，用普通光镜和Hoechst33258荧光染色观察hUVEC细胞形态和核形态的变化，用MTT比色法检测细胞存活状况。

语种： 中文

作者： 赵战芝;李国华;王仁;谭建苗;金海燕;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年(7):587 ISSN：1007-3949

作者机构： 南华大学心血管病研究所;南华大学机能学实验中心

关键词： 硫氢化钠;THP-1源性巨噬细胞;清道夫受体A

摘要： 目的硫氢化钠抑制THP-1源性巨噬细胞脂质摄取，但机制不清楚。巨噬细胞通过清道夫受体（SR-A和CD36）摄取脂质。本研究探讨硫氢化钠对THP-1源性巨噬细胞清道夫受体SR-A和CD36表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应和Westernblotting检测SR-A和CD36的mRNA和蛋白表达。结果50mg／L氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）处理巨噬细胞后明显上调SR-A和CD36的mRNA和蛋白水平，而硫氢化钠（25～200μmol／L）呈剂量依赖性抑制OX—LDL诱导的SR—A和CD36的mRNA和蛋白表达。

语种： 中文

作者： 赵战芝(综述);姜志胜(审校)

期刊： 中国动脉硬化杂志,2009年17(12):1038-1040,1044 ISSN：1007-3949

作者机构： [赵战芝(综述); 姜志胜(审校)] 南华大学心血管病研究所

关键词： 硫化氢;动脉粥样硬化;气体信号分子

摘要： 硫化氢以其毒性作用为人所知几百年,现在被誉为第三个气体信号分子.硫化氢主要在胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-γ-裂解酶作用下酶性产生,具有舒张血管、调节血压、抑制血管平滑肌细胞增殖和低密度脂蛋白氧化修饰等功能.以栽脂蛋白E基因敲除小鼠为模型的一项研究显示,抑制内源性硫化氢产生将促进主动脉病变形成,而补充外源性硫化氢可抑制主动脉病变形成.这些数据表明硫化氢是动脉粥样硬化发生发展的新调节物质.文章就硫化氢的抗动脉粥样硬化效应做一综述.

语种： 中文

作者： 蔺洁;王绿娅;潘晓冬;肖文虎;王旭;...

期刊： 现代生物医学进展,2009年9(19):3605-3608 ISSN：1673-6273

作者机构： 南华大学医学院心血管病研究所,湖南省动脉粥样硬化学重点实验室,湖南,衡阳,421001;首都医科大学附属北京安贞医院,北京市心肺血管疾病研究所,北京,100029;[蔺洁; 姜志胜; 肖文虎] 南华大学;[王绿娅; 杜兰平; 王旭; 潘晓冬] 首都医科大学附属北京安贞医院

关键词： 家族性高胆固醇血症;复合杂合;基因突变;低密度脂蛋白受体

摘要： 目的：对1例临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症（FH）先证者及其核心家系成员进行基因检测分析,探讨患儿发病的分子病理基础。方法：收集先证者及父母血标本及临床资料,酚氯仿法提取基因组DNA,DNA直接测序方法检测低密度脂蛋白受体（LDL-R）基因18个外显子和启动子及载脂蛋白B（ApoB100）R3500Q位点,核苷酸序列分析结果与Gen Bank比对寻找突变。结果：（1）先证者三尖瓣轻度关闭不全,先证者父母双侧颈总动脉内-中膜增厚,先证者母亲左侧颈内动脉起始处后壁多发混合回声斑块（2）该家系排除ApoB100基因R3500Q突变;（3）先证者LDL-R基因第13外显子发生A606T和D601Y复合杂合突变,前者第1879位G→A碱基置换,导致丙氨酸改变为苏氨酸,后者为1864位G＆gt;T碱基置换,导致天冬氨酸改变为酪氨酸,其父为携带A606T突变的杂合子,其母为携带D601Y突变的杂合子。结论：先证者LDL-R基因存在A606T和D601Y复合杂合突变,它们分别来源于父系及母系遗传。

语种： 中文

作者： 尹凯;桂庆军;文格波;涂玉林;姜志胜

作者机构： 南华大学 临床技能实践教学中心

会议名称： 第十二届全国高等医学院校诊断学教学研讨会(体外诊断学进展与教学改革发展论坛)

会议时间： 2009-07-01

会议地点： 北京

会议论文集名称： 第十二届全国高等医学院校诊断学教学研讨会(体外诊断学进展与教学改革发展论坛)论文集

关键词： 医学院校;诊断学教学;临床技能教学;考核新模式;教学改革

摘要： 随着《全球医学教育基本要求》和《国家医学教育标准》的颁布，以及“教育部、卫生部关于加强医学教育工作提高医学教育质量的若干意见”(教高(2009)4号文件)的实施，培养和造就一支为社会主义现代化建设服务，具有良好职业素质、实践能力和创新精神的卫生人才队伍是高等医学院校教学工作的重要目标。临床技能实践教学作为现代医学教育的重要内容，是实现这一目标的关键组成部分。我校作为一所主要面向地方(基层)卫生服务事业培养优秀医学人才的地方大学，近年来为适应现代医学教育模式的转变，在临床技能教学平台的构建、教学手段的更新、教学与考核模式的转变等方面做了大量的探索性工作。通过研究与实践，我们对在校教育过程中如何提高医学生临床实践操作技能和职业素质，如何尽快适应现实医疗环境有了新的思路，本文从传统临床技能教学存在的问题以及我校临床技能教学与考核新模式的实践等方面谈谈认识。

语种： 中文

作者： 尹凯;桂庆军;文格波;涂玉林;姜志胜

期刊： 中国高等医学教育,2009年(12):21-22 ISSN：1002-1701

作者机构： 南华大学医学院,湖南,衡阳,421001;[文格波; 涂玉林; 桂庆军; 姜志胜; 尹凯] 南华大学

关键词： 临床技能;教学;考核;新模式;实践

摘要： 临床技能实践教学是现代医学教育的重要内容,是实现《中国本科医学教育标准》的关键环节。然而,传统医学生临床技能培养模式存在教学内容重复、教学资源分散和考核手段单一等问题。为克服传统教学模式的弊端,我校对临床技能教学与考核模式进行了创新性改革与实践,取得了良好教学效果。

语种： 中文

作者： Liu Lu-Shan*;Xie Min;Jiang Zhi-Sheng;Yang Qiong;Pan Li-Hong;...

期刊： 生物化学与生物物理进展,2009年36(3):323-330 ISSN：1000-3282

通讯作者： Liu Lu-Shan

作者机构： [Wu Chun-Yan; Pan Li-Hong; Wang Zuo; Xie Min; Jiang Zhi-Sheng; Tang Chao-Ke; Yang Qiong; Liu Lu-Shan; Tang Zhi-Han; Wei Dang-Heng] Univ S China, Inst Cardiovasc Dis, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Hengyang 421001, Peoples R China.

通讯机构： [Liu Lu-Shan] U;Univ S China, Inst Cardiovasc Dis, Key Lab Arteriosclerol Hunan Prov, Hengyang 421001, Peoples R China.

关键词： 氧化型低密度脂蛋白;前蛋白转化酶枯草溶菌素9/神经细胞凋亡调节转化酶-1;巨噬细胞;凋亡;小分子干扰RNA

摘要： 为研究pcsk9基因沉默后对氧化型低密度脂蛋(oxLDL)诱导THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响,用不同浓度oxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48 h,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测pcsk9 mRNA、NARC-1蛋白的表达.应用Lipofectamine2000转染3对pcsk9 siRNAs进THP-1源性巨噬细胞中,筛选出最有效的siRNA再转染入THP-1源性巨噬细胞,24 h后加入oxLDL处理48 h,Hoechst33258染色观察细胞评价细胞凋亡,流式细胞术计数检测细胞凋亡率.结果发现,75 mg/L oxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48 h后,Hoechst33258染色可见大量凋亡细胞.同时RT-PCR、Western blot检测发现,pcsk9 mRNA和NARC-1蛋白质表达量均随oxLDL浓度的增加而增加,75 mg/L oxLDL组增加最明显.不同浓度siRNA转染THP-1源性巨噬细胞后,RT-PCR筛选出3对siRNAs的终浓度为80 nmol/L均可出现明显的沉默效应.选取此浓度在蛋白质水平检测基因抑制情况,筛选出最有效的一对siRNA.将筛选出来的siRNA转染细胞24 h后,再用oxLDL处理48 h,Hoechst33258染色及流式细胞计数结果显示,转染siRNA组凋亡明显被抑制.结果表明,在本研究的浓度范围内,随着oxLDL浓度增加pcsk9的表达随之增加,同时,THP-1源性巨噬细胞凋亡也明显增加,75 mg/L oxLDL最明显,pcsk9 mRNA和蛋白质的表达也在该浓度最高.提示pcsk9 siRNA能有效抑制pcsk9基因的表达,从而有效抑制由oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞的凋亡.

语种： 中文