目的:通过基因工程技术,表达梅毒螺旋体(Treponema pallidum, Tp)重组蛋白Tp0463,探讨其在梅毒临床血清学诊断中的价值,为发现Tp新的候选诊断抗原提供实验依据。方法:从Genbank获取Tp0463蛋白的基因序列,以Tp Nichols标准株的全基因组DNA为模板,PCR扩增该基因编码第8-110号氨基酸的基因片段;将目的基因克隆入T-A克隆载体pMD18-T中,再亚克隆入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a(+)/Tp0463,经PCR、双酶切与测序鉴定后转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE分析目的产物的表达形式,用Ni-NTA亲和层析法纯化目的重组蛋白,SDS-PAGE分析纯化蛋白的...