目的:幽门螺杆菌感染引起的胃部炎症性变化是产生胃部疾病的主要原因,而幽门螺杆菌Tipα蛋白是新近发现引起炎症反应的主要致炎蛋白, NLRP3炎性小体是炎症反应的重要调节因子,本实验以佛波酯(PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞为模型,初步探讨NLRP3炎性小体在Tipα蛋白诱导炎性细胞因子分泌中的作用。 方法: 1. Tipα蛋白的表达与鉴定:Genbank查获Tipα全基因序列,PCR法获取去除信号肽后的 Tipα基因序列,构建 pET-30a(+)/Tipα重组载体;测序鉴定。将pET-30a(+)/Tipα重组载体转化至E.coli BL21(DE3)表达菌内,诱导表达、Ni-NTA纯化、去内毒素处理,Western blot鉴定, BCA法测定T...