期刊论文

中文

微生物学免疫学进展

1005-5673

2014

1

13-16

10.13309/j.cnki.pmi.2014.01.003

湖南省教育厅项目（12C0342） 湖南省科学技术厅计划项目（2013FJ6068）湖南省卫生厅项目（B2011-043）

本校为第一机构

目的：构建人乳头瘤病毒l6型（HPV16）E6-E7融合蛋白真核表达载体，为研究其基因疫苗免疫活性奠定实验基础。方法 PCR扩增HPV16 E6-E7基因片段，将其连接到真核表达载体pcDNA3．1（＋），构建真核表达载体pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7，双酶切及测序鉴定。将质粒转染HeLa细胞，RT-PCR鉴定E6-E7基因在HeLa细胞中的表达。提取质粒免疫小鼠，利用免疫组化方法检测在其肌肉组织中的表达。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7；在转染pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7的细胞中检测到HPV16 E 6-E7基因。在免疫该质粒的小鼠肌肉组织中可以检测到该质粒的蛋白表达。结论成功的构建的了真...

Objective To construct an eukaryotic expression vector of HPV 16 E6-E7 fusion protein, for a further study of immunogenicity for the gene vaccine of human papillomavirus type 16 （ HPV16） E6-E7.Methods Eukaryotic expression vector pcDNA3.1（＋）/HPV16 E6-E7 was constructed by inserting into pcDNA3.1（＋）.Enzymes digestion and DNA se-quencing were used to identify E6-E7 gene fragment.HeLa cells were transfected with DNA of plasmid HPV 16 E6-E7 and gene expressions were analyzed by RT-PCR.Immuno-histochemical staining was used to detect the exp...