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梅毒螺旋体重组蛋白TpF1在梅毒血清学诊断中的应用

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成果类型:
学位论文
作者:
蒋传好
作者机构:
[蒋传好] 南华大学
导师:
吴移谋;赵飞骏
语种:
中文
关键词:
梅毒螺旋体;TpF1蛋白;血清学;原核表达
关键词(英文):
TpF1
学位年度:
2013
学位授予单位:
南华大学
学科专业:
病原生物学
授予学位:
硕士
机构署名:
本校为第一完成单位
摘要:
目的:构建梅毒螺旋体(Treponema palludim, Tp)重组蛋白TpF1的原核表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,纯化表达产物并进行免疫原性和免疫反应性分析,为进一步探索重组蛋白TpF1在梅毒血清学诊断中的应用及其生物学功能提供一定的实验依据。  方法:从GenBank获取TpF1基因序列,设计引物,以Tp Nichols标准株基因组DNA为模板,PCR扩增其全基因片段;构建pET28a-TpF1原核表达载体,酶切、测序鉴定后,转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导重组蛋白TpF1的表达,SDS-PAGE和WesternBlot对表达产物进行分析、鉴定;用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白,BCA法测定蛋白浓度;收集重组蛋白...

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