目的:构建梅毒螺旋体(Treponema palludim, Tp)重组蛋白TpF1的原核表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,纯化表达产物并进行免疫原性和免疫反应性分析,为进一步探索重组蛋白TpF1在梅毒血清学诊断中的应用及其生物学功能提供一定的实验依据。 方法:从GenBank获取TpF1基因序列,设计引物,以Tp Nichols标准株基因组DNA为模板,PCR扩增其全基因片段;构建pET28a-TpF1原核表达载体,酶切、测序鉴定后,转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导重组蛋白TpF1的表达,SDS-PAGE和WesternBlot对表达产物进行分析、鉴定;用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白,BCA法测定蛋白浓度;收集重组蛋白...