目的:筛选比较梅毒螺旋体(Treponemapallidum,Tp)各外膜蛋白的抗原性和同源性,分别构建真核表达重组体pcDNA3.1(+)-Gpd、pcDNA3.1(+)-Tp92和双基因融合表达重组体pcDNA3.1(+)-Gpd-Tp92,检测其所诱导产生的体液免疫和细胞免疫应答水平,比较单基因核酸疫苗和双基因融合核酸疫苗的免疫效果,为研制高效、新型的Tp核酸疫苗提供实验依据。
方法:用PCGENE软件分析Tp外膜蛋白Gpd和Tp92基因序列,设计相应特异性引物,PCR分别扩增上述两基因1059bp和2103bp的目的基因片段,将其插入pUCm-T载体,通过蓝白斑初筛,酶切分析、PCR及测序鉴定筛选阳性重组体;将Gpd和Tp92基因亚克隆至真核表达载体...